放射線によるミトコンドリアDNAの変異誘発

2004 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16651029
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 石崎 寛治 愛知県がんセンター(研究所), 中央実験部, 部長 (70111987)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 組本 博司 愛知県がんセンター(研究所), 中央実験部, 研究員 (00291170)
• Keywords: 食道がん / ミトコシドリア / 放射線感受性 / Dループ / Δ4977 / D310 / 変異

Research Abstract

食道がん培養細胞株31株について、本実験に用いる細胞株を決定するためミトコンドリアゲノムDNAのDループ領域の塩基配列を調べた。コモン配列と異なる塩基の数が多い株2株(KYSE-170,KYSE-410)を選択した。また、食道がんにおいて高頻度に変異が見られるD310のCの繰り返し数がヘテロになっている株2株(KYSE-30,KYSE-170)を選択した。さらに、放射線高感受性を示す株1株(KYSE-190)を選択した。これら5株について、X線照射後の生存率を調べ、生存率0.01となる照射量を決定したところ、KYSE-30,KYSE-110,KYSE-170,KYSE-190,KYSE-410において、それぞれ9,7,11,4.5,7 Gyであった。
老化細胞などに見られる特異的欠失、Δ4977を検出するため、特異的欠失の外側と内側に蛍光プライマーを設定し、PCR後Gene Scanによって検出可能な系を確立した。また、食道がんにおいて高頻度に変異が見られるD310の繰り返し配列に関しても蛍光プライマーを用いたPCR後Gene Scanによってそれぞれの存在比を定量出来る系を確立した。さらに、突然変異を検索するため、ミトコンドリアゲノム上の遺伝子であるCOI (cytochorome oxidase subunit I)をPCR-塩基配列決定法により解析する系を用意した。

Research Products

• [Journal Article] Frequent somatic mutations of mitochondrial DNA in esophageal squamous cell carcinoma. (2004)
  • Author(s): Kumimoto, H., Yamane, Y., Nishimoto, Y., Fukami, H., Shinoda, M., Hatooka, S.Ishizaki, K.
  • Journal Title: Int.J.Cancer 108 Pages: 228-231