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2005 Fiscal Year Annual Research Report

細胞骨格がメカノセンサーであることを検証する研究

Research Project

Project/Area Number 16657055
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

曽我部 正博  名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10093428)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 辰巳 仁史  名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (20171720)
Keywords内皮細胞 / ストレス線維 / アクチン線維 / 機械刺激 / 脱重合 / メカノセンサー / コフィリン / レーザーピンセット
Research Abstract

すべての細胞は機械刺激を感知して様々な応答を示すが、その分子機構は謎である。その最大の理由は、メカノセンサーの分子実体やその仕組みが不明な点にある。現在唯一明瞭なメカノセンサーは膜伸展で活性化されるSAチャネルであるが、我々は最近細胞骨格(ストレス線維)がSAチャネル活性化における力の伝達媒体として働くと同時にそれ自身が機械刺激を感知して構造変化するメカノセンサーである可能性を見出した。
本研究の目的は、インタクト細胞、セミインタクト細胞、in vitroアクチン線維の3つの標本を用いて機械(伸長)刺激に対するストレス(アクチン)線維の動態を解析し、ストレス(アクチン)線維がメカノセンサーであることを検証することである。平成16年度におけるインタクト細胞、およびセミインタクト細胞を用いた実験において、ストレス線維の張力が微小な時には、コフィリンがアクチン線維を脱重合してストレス線維の崩壊を導くことが示唆された。本年度は、in vitroの実験系でこの仮説を直接検証することを試みた。
まずin vitroで蛍光標識した単一アクチン線維を調整し、アクチン線維の一端を、ミオシンでコートしてカバースリップに固定した大型ビーズで把持する。ついでアクチン線維の自由端にミオシンコートした小型ビーズを付着させ、レーザーピンセットで把持して、様々な張力を与えながら調節蛋白質(cofilin)によるストレス線維の崩壊をリアルタイムイメージングした。その結果、弛緩状態のアクチン線維はcofilinによって速やかに脱重合した。一方、レーザーピンセットによって伸張されたアクチン線維はストレス依存的にcofilinによる切断に対して抵抗性を示した。インタクト細胞に蛍光標識したcofilinを細胞内注入することにより、cofilinの結合そのものが、アクチン線維の張力によって調節されることが分かった。

  • Research Products

    (7 results)

All 2005

All Journal Article (6 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Mechanosensitive BK Channel Activated by Membrane Stress Created by Amphipaths2005

    • Author(s)
      Qi Z, Chi S, Su X, Naruse K, Sokabe M
    • Journal Title

      Mol Membr Biol. 22(6)

      Pages: 519-527

  • [Journal Article] Pregnenolone sulfate enhances presynaptic glutamate releases in rat hippocampal slices as studied by optical recordings2005

    • Author(s)
      Chen L, Sokabe M.
    • Journal Title

      J Neurophysiol 94(6)

      Pages: 4131-4144

  • [Journal Article] Characteristics of Subepithelial Fibroblasts as a Mechano-Sensor in the Intestine : Cell-Shape Dependent ATP Release and P2Y1 Signaling.2005

    • Author(s)
      Furuya K, Sokabe M, Furuya S
    • Journal Title

      J Cell Sci 118(15)

      Pages: 3289-3304

  • [Journal Article] Involvement of reactive oxygen species in cyclic stretch induced NF-κ B activation in human fibroblast cells.2005

    • Author(s)
      Amma H, Naruse K, Ishiguro N, Sokabe M
    • Journal Title

      Br J Pharmacol 145(3)

      Pages: 364-373

  • [Journal Article] Mechanotransduction by integrin is essential for interleukin-6 secretion from human umbilical vein endothelial cells in response to uni-axial continuous stretch.2005

    • Author(s)
      Sasamoto A, Nagino M, Kobayashi S, Naruse K, Nimura Y, Sokabe M
    • Journal Title

      Am J Physiol : Cell Physiol 288(5)

      Pages: 1012-1022

  • [Journal Article] Identification of functional domains of Mid1, a stretch-activated channel component, necessary for localization to the plasma membrane and Ca^<2+> permeation2005

    • Author(s)
      Ozeki-Miyawaki C, Moriya Y, Tatsumi H, Iida H, Sokabe M
    • Journal Title

      Exp Cell Res 311(1)

      Pages: 84-95

  • [Book] Effects of mechanical stresses on the migrating behavior of endothelial cells., In "Biomechanics at Micro - and Nanoscale Levels, Volume I" (ed.H.Wada)2005

    • Author(s)
      Tanaka K, Naruse K, Sokabe M.
    • Total Pages
      173
    • Publisher
      World Scientific Publishing

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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