2004 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
16658037
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
村田 幸作 京都大学, 農学研究科, 教授 (90142299)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河井 重幸 京都大学, 農学研究科, 助手 (00303909)
|
|---|
| Keywords | 非必須遺伝子欠損株 / 酵母 / 形質転換能 / DNA取り込み / arp2 / 3複合体 / エンドサイトーシス / クラスリン / アクチン |
|---|
| Research Abstract |
酵母非必須遺伝子欠損株約5,000株全ての形質転換能を網羅的に調べた。その結果、高形質転換能株[pde2(高親和性cAMPフォスフォジエステラーゼ欠損株)、spf1(小胞体局在性P-type ATPase型[基質不明]欠損株)、pmr1(ゴルジ体局在性P-type ATPase型Ca^<2+>/Mn^<2+>トランスポーター欠損株)]、および低形質転換能株[she4(Myo3/5pのシャペロン欠損株)、arc18(Arp2/3複合体サブユニット欠損株)、sin3(転写調節因子欠損株)]を同定した。また、myo3myo5、arp2、arp3、arc15、arc19、yrp1、las17、およびpan1も低形質転換能株であることを示した。低形質転換能株ではいずれも、アクチンの重合化に関わる複合体(arp2/3複合体)、及びその活性化因子(Pan1p, Vrp1p, Las17p, Myo3p, Myo5p)の機能が不完全である。従って、arp2/3複合体、並びにその活性化因子(併せてarp2/3マシナリーと呼ぶ)が形質転換において重要な役割を担っていると推察された。一方、本マシーナリーの構成成分欠損株は、エンドサイトーシス能も欠損している。そして、本マシナリーはエンドサイトーシスにおいて、細胞膜の陥入による物質取り込み過程の推進・制御に深く関わると強く示唆されている。一方、細胞膜の陥入過程には、Ent1/2pやクラスリン(Chc1p)も重要な機能を果たす。Ent1/2pはPan1pと相互作用することから、ent1ent2欠損株の形質転換能を検討した結果、同欠損株も形質転換能欠損株であった。以上の知見を考え併せ、形質転換において、DNA取り込みはエンドサイトーシス様に細胞膜の陥入により推進・制御されると推察された。
|
Research Products
(3 results)
