2004 Fiscal Year Annual Research Report
膵ラ島β細胞ミトコンドリアを標的とする遺伝子治療の開発
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16659236
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
鈴木 進 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70216399)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
檜尾 好徳 東北大学, 病院・講師 (10282071)
平井 完史 東北大学, 病院・助手 (80312578)
石原 寿光 東北大学, 病院・助手 (60361086)
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| Keywords | 糖尿病 / ミトコンドリア / ミトコンドリアDNA / 一塩基置換修復法 / Chimeric RNA / DNA / 膵ラ島β細胞 / インスリン / ガングリオシド抗体 |
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| Research Abstract |
ミトコンドリアはDNA修復酵素系に富み,ダイナミックにミトコンドリアDNA (mtDNA)変異の修復を受けていることがわかってきた.mtDNA修復系の特徴から,Chimeric RNA/DNA oligonucleotidesの有効性が期待されている.海外共同研究者のd'Alarcao教授らはoligonucleotidesをアルキルトリフェニルホスホネート(APP)誘導体化すると,ミトコンドリア内へ効率よく集積することを発見した.本研究では,mtDNA変異を標的としたChimeric RNA/DNA oligonucleotidesを作成し,APPで誘導体化して,ミトコンドリア集積性を高めて,mtDNA変異を標的とする一塩基置換修復法を開発する.
1.ミトコンドリアDNAを分子標的とする特異的一塩基置換修復法の開発
ミトコンドリアDNA3243A/G変異を標的とするChimeric RNA/DNA oligonucleotidesを化学合成した.正常ミトコンドリアDNAと3243G変異DNAのmixtureをテンプレートとしたミトコンドリアDNA複製系に,Chimeric RNA/DNA oligonucleotidesを添加すると,容量依存性に3243G変異が修復されることが明らかにした.
2.化学合成Chimeric RNA/DNA oligonucleotidesのアルキルトリフェニルホスホネート(APP)誘導体化
Chimeric RNA/DNA oligonucleotidesを化学合成し,アルキルトリフェニルホスホネート誘導体(APP)による修飾が可能か,検討した.対照としたDNA oligonucleotidesに比べて,Chimeric RNA/DNA oligonucleotidesは,APP化修飾効率が対照の約20%と低いことが明らかになった.
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