放射線によるEGF受容体活性化の原因解明とDNA損傷修復系への影響

2004 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16659313
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 細井 義夫 東京大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (50238747)
• Keywords: 細胞増殖因子受容体 / 放射線 / 放射線感受

Research Abstract

放射線照射によりepidermal growth factor(EGF)受容体が活性化することにより細胞が放射線抵抗性になる原因として、DNA2重鎖切断修復の効率が変化する可能性が考えられた。このため、DNA2重鎖切断修復経路のうち、ヒトの細胞で重要と考えられるnon-homologous end-joining(NHEJ)に重要な役割を果たすDNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-dependent protein kinase; DNA-PK)を構成する3つの蛋白質、DNA-PKcs、Ku70、Ku80蛋白質量に及ぼすEGF投与の影響を検討した。その結果、EGF投与はそれらの蛋白質の発現に影響を与えなかった。次にEGF受容体の選択的阻害剤であるTyrphostin AG1478を用いて同様にDNA-PK構成蛋白質量に対する影響を検討した。その結果、EGF受容体の阻害はそれらに影響を与えなかった。これらのことから、EGF受容体の活性化による放射線抵抗性の原因はDNA-PK転写を介したものではないことが明らかになった。また、EGF受容体の活性化に重要なリン酸化部位に対する特異的な抗チロシン抗体を用いて放射線照射の影響を検討すると、一部の部位ではリン酸化が放射線照射によって低下していることを明らかにした。この可能性として、phosphataseが放射線により活性化していることが考えられた。そこでphosphataseの活性をpNPPアッセイにより測定した結果、2Gy照射直後に活性が亢進し照射6時間後に低下する傾向が認められた。このことから、放射線照射によりphosphatase活性が変化しそれがEGF受容体の活性化に影響を及ぼしている可能性が考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Suppression of anchorage-independent growth by expression of the ataxia-telangiectasia group D complementing gene, ATDC. (2004)
  • Author(s): Hosoi, Y. et al.
  • Journal Title: Molecular Carciogenesis (In press)
• [Journal Article] Up-regulation of DNA-dependent protein kinase activity and Sp1 in colorectal cancer. (2004)
  • Author(s): Hosoi, Y. et al.
  • Journal Title: International Journal of Oncology 25 Pages: 461-468
• [Journal Article] Spontaneous mutations in Digestive tract of old mice show tissue-specific patterns of genomic instability. (2004)
  • Author(s): Ono, T., Ikehata, H., Pithani.V.P., Uehara, Y., Chan, Y., Kinouchi.Y., Shimosegawa, Y., Hosoi, Y.
  • Journal Title: Cancer Research 64 Pages: 6919-6923
• [Journal Article] Radiosensitization by hyperthermia in the chicken B-lymphocyte cell line DT40 and its derivatives lacking nonhomologous end joining and/or homologous recombination pathways of DNA bouble-strand break repair. (2004)
  • Author(s): Yin, H.L., Suzuki, Y., Matsumoto, Y., Tomita, M., Furusawa, Y., Enomoto, A., Motrita, A., Aoki, M., Yatagai, F., Suzuki, T., Hosoi, Y.et al.
  • Journal Title: Radiation Research 162 Pages: 433-441
• [Journal Article] Potentiality of DNA-dependent protein kinase to phosphorylate Ser46 of human p53. (2004)
  • Author(s): Komiyama, S., Taniguchi, S., Matsumoto, Y., Tsunoda, E., Ohto, T., Suzuki, Y., Yin, H.-L., Tomita, M., Enomoto A., Motita A., Suzuki, T., Ohtomo, K., Hosoi, Y.et al.
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications 323 Pages: 816-822
• [Journal Article] Suramin sensitizes cells to ionizing radiation by inactiveating DNA-dependent protein kinase. (2004)
  • Author(s): Hosoi, Y. et al.
  • Journal Title: Radiation Research 162 Pages: 308-314