2018 Fiscal Year Annual Research Report
Improvement of medaka embryo toxicity assay by a novel pulsed power electroporation system
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16H02990
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| Research Institution | Ariake National College of Technology |
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Principal Investigator |
冨永 伸明 有明工業高等専門学校, 創造工学科, 教授 (30227631)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 圭介 東邦大学, 薬学部, 准教授 (60380854)
大河平 紀司 有明工業高等専門学校, 創造工学科, 准教授 (60629210)
有薗 幸司 熊本県立大学, 環境共生学部, 教授 (70128148)
石橋 弘志 愛媛大学, 農学研究科, 准教授 (90403857)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 発生毒性 / メダカ / 高電界パルス / 動物代替試験 / ネオニコチノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は計画に基づき，主に以下の成果を得た．
1.物質導入法を用いたTG236のメダカへの改良(冨永，有薗) 本年度は，親化合物ジノテフランおよび合成した3種類の代謝生成物を高電界パルス法により，メダカ卵に導入し，影響を評価した．親化合物およびいずれの代謝生成物も急性毒性は低かった．一方，すべての化合物において同程度の割合で発生に異常を及ぼすことが分かった．昨年度の結果と比較するとアセタミプリド，イミダクロプリドにおいては代謝生成物の中に親化合物より発生毒性が弱いもの，強いものが存在したが，ジノテフラン代謝生成物はほとんど変化がないことがわかり，生体内代謝により発生毒性変化は化合物特有の可能性があることが分かった．本研究においてネオニコチノイド系農薬は従来の評価方法で示されている通り致死影響は低いことが確認されたが，低濃度で発生毒性を有することもわかった．
2.取り込み量の定量（大河平）ジノテフランのメダカ卵への取り込み量の実測に成功した．実測値で暴露外液濃度(400ppm)に対し，卵液中にパルス処理なし（28 ppm），あり(90 ppm)であったことから，パルス処理を行うことで外液から効率よくメダカ卵中にジノテフランが導入できていることが確認できた．
3.化学物質の毒性発現機構の分子生物学的な解明（冨永，石橋）ジノテフランおよび代謝生成物暴露メダカ卵における次世代シークエンサーによる発現解析を行った．各化合物の暴露濃度が異なる遺伝子プロファイルを用い，クラスター及びPCA解析においてジノテフランと代謝物はアセタミプリド，イミダクロプリドとは異なるクラスターを形成したことから，化合物特異的な応答があり，環境中で検出される代謝生成物も親化合物と同様な影響を示すことが分かった．また，パスウエイ解析においては共通パスウエイが存在したが，化合物に特異的なパスウエイの存在も見出された．
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| Research Progress Status |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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