2016 Fiscal Year Annual Research Report
Screening and application of drugs that facilitate membrane trafficking in order to overcome ER stress-related diseases
| Project/Area Number |
16H05133
|
|---|
| Research Institution | Hiroshima University |
|---|
Principal Investigator |
酒井 規雄 広島大学, 医歯薬保健学研究院(医), 教授 (70263407)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
秀 和泉 広島大学, 医歯薬保健学研究院(医), 助教 (20253073)
田中 茂 広島大学, 医歯薬保健学研究院(医), 講師 (20512651)
白藤 俊彦 広島大学, 医歯薬保健学研究院(医), 助教 (30595765)
淵上 学 広島大学, 医歯薬保健学研究院(医), 助教 (40403571)
太田 茂 広島大学, 医歯薬保健学研究院(薬), 教授 (60160503)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | セロトニントランスポーター / ケミカルシャペロン / 小胞体ストレス / 薬物検索 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
① SERTΔCT の取り込み活性を上昇させる膜輸送活性化薬物のスクリーニング法の開発
１） 蛍光標識SERT 基質用いたハイスループットスクリーニング法開発への取り組み：Molecular device 社のNeurotransmitter Transporter Uptake Assay Kit を用いて野生型SERT及びSERTΔCTの取り込みをハイコンテント顕微鏡Operaphnixを用いて検討し、蛍光基質を用いたSERTの取り込み活性の計測方法を確立した。野生型SERTの取り込み活性については、信頼性の高い再現性のある測定結果を得ることができたが、SERTΔCTの取り込み活性は予想に反して観察することができなかった。
２）SERTΔCT の凝集体形成を指標にした膜輸送活性化薬のスクリーニング法の開発：ハイコンテント顕微鏡OperaPhenixを用いてSERTΔCTの凝集対形成を認識させ、各種薬物の凝集体形成に対する効果を判定する実験手法を確立した。ケミカルシャペロンの4-PBAを処置すると凝集体形成の抑制効果が見られた。
② 薬物により変動する遺伝子群のcDNAアレイによる網羅的解析
シグマ受容体アゴニストのSKF-10047処置による遺伝子変動を解析し複数の有力な変動遺伝子を同定した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
蛍光標識SERT 基質用いた計測方法、SERTΔCT の凝集体形成を指標にした計測方法、ともに確立することができた。
薬物により変動する遺伝子群のcDNAアレイによる網羅的解析に着手することができた。
|
| Strategy for Future Research Activity |
確立されたスクリーニング法を用いて、薬物検索を進めていく。蛍光基質を用いてSERTΔCTの活性が測定できなかった原因を探り、さらなる改善方法がないか、検討する。cDNAアレイによる網羅的解析の結果を検証する。
|
Research Products
(22 results)
-
-
[Journal Article] Modifications of tau protein after cerebral ischemia and reperfusion in rats are similar to those occurring in Alzheimer's disease - Hyperphosphorylation and cleavage of 4- and 3-repeat tau.2017
Author(s)
Fujii, H., Takahashi, T., Mukai, T., Tanak,a S., Hosomi, N., Maruyama, H., Sakai, N., and Matsumoto, M.
-
Journal Title
J Cereb Blood Flow Metab.
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
-
-
[Journal Article] The Toll-like receptor 4-activated neuroprotective microglia subpopulation survives via granulocyte macrophage colony-stimulating factor and JAK2/STAT5 signaling.2016
Author(s)
Kamigaki, M., Hide, I., Yanase, Y., Shiraki, H., Harada, K., Tanaka, Y., Seki, T., Shirafuji, T., Tanaka, S., Hide, M., and Sakai. N.
-
Journal Title
Neurochem. Int.
Volume: 93
Pages: 82-94
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
-
[Journal Article] The development of screening methods to identify drugs to limit ER stress using wild-type and mutant serotonin transporter.2016
Author(s)
Katarao, K., Murakawa, S., Asano, M., Usuki, N., Yamamoto, H., Shirafuji, T., Tanaka, S., Hide, I. and Sakai, N.
-
Journal Title
Acta Histochem.Cytochem.
Volume: 49
Pages: 197-206
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
