2016 Fiscal Year Annual Research Report
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16H05401
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
宮川 周士 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90273648)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
長嶋 比呂志 明治大学, 農学部, 専任教授 (50318664)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | バイオ人工膵島 / 異種移植 / 新奇遺伝子開発 / 補体制御因子 / Hybrid / 抗凝固因子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
補体制御と抗凝固に関するハイブリッド分子として、NCTDM (C1-INH + Thrombomodulin + DAF(CD55) + MCP(CD46)= CTDMのThrombomodulin部分にそのEGFdomain-3のアミノ酸配列１０個程度追加したものを作成した。
しかし、このNCTDMの発現が、作成済みのCTDMに比して、非常に弱いことが判明した。従って、CDMとThrombomodulinの二つに分けての両方を2Aシステムで繋ぐ事にし、別々に発現させる事にした。既に基本的な遺伝子の構築自体は完成した。
また、新しくαGal及びHanganutziu-Deicher(H-D)抗原をknockoutする予定のマイクロミニブタのgenome遺伝子を抽出し、既報のブタのαGal及びH-D抗原のtarget部分のDNA配列と差異がない事を確認した。
加えて、ブタに導入する他の遺伝子を検討するための基礎研究として、CD200、およびSP－D(肺サーファクタント蛋白)のmonocyte/macrophageの細胞障害機能に対する制御機能を研究した。CD200に関してはそのまま、SP-Dに関しては同じコレクチン且つ膜型であるCL-P1のCarbohydrate recognition domain (CRD)部分をこのSP-Dと入れ替えたcDNAを作出し、ブタの血管内皮に発現させた。結果として、これらの分子がヒトmonocyte/macrophageに対する細胞傷害機能を制御する事を確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
一応計画した分子の作成は行ったが、記述の様に、ブタ細胞での十分な発現が伴わなかった。現在、新しく改良型ThrombomodulinをCDMとは別の分子として発現させる様に遺伝子を組み替えている。
既に基本の遺伝子骨格は作成できたので、発現vectorに組み込むところである。
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| Strategy for Future Research Activity |
CDM+Thrombomodulinは早期に発現ベクターに組み込み、CTDMと発現を比較検討し、さらにThrombomodulin部分の抗凝固機能に関して検討を加える予定である。つまり、どちらを採用するか検定していく。
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[Presentation] Human DAF suppresses macrophage-mediated xenogeneic cytotoxicity and phagocytosis through the binding of SCR-4 to the inhibitory receptor2016
Author(s)
Rieko Sakai, Akira Maeda, Thuy-Vy Choi, Pei-Chi Lo, Rei Matsuura, Tasuku Kodama, Kazuaki Yamanaka, Kengo Nakahata, Tomomi Kawai, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
Organizer
International Complement Workshop
Place of Presentation
金沢市
Year and Date
2016-09-04 – 2016-09-08
Int'l Joint Research
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[Presentation] SCR-4 is required for CD55-induced suppression on macrophage-mediated cytotoxicity2016
Author(s)
Akira Maeda, Thuy-vy Choi, Pei-Chi Lo, Rieko Sakai, Mayumi Asada, Kazuaki Yamanaka, Kengo Nakahata, Rei Matsuura, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
Organizer
The Transplantation Society
Place of Presentation
香港(中国）
Year and Date
2016-08-20 – 2016-08-23
Int'l Joint Research
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[Presentation] Human CD200 suppresses the M0 macrophage-mediated cytotoxicity in xenotransplantation2016
Author(s)
Akira Maeda, Pei-Chi Lo, Thuy-vy Choi, Rieko Sakai, Mayumi Asada, Kazuaki Yamanaka, Kengo Nakahata, Rei Matsuura, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
Organizer
The Transplantation Society
Place of Presentation
香港(中国）
Year and Date
2016-08-20 – 2016-08-23
Int'l Joint Research
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