The development for the stable high expression of numerous transgenes.

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16H05401
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 宮川 周士 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90273648)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 長嶋 比呂志 明治大学, 農学部, 専任教授 (50318664)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: Xenotransplantation / Gene-modified pigs / Hybrid gene / Complement / Macrophage / Innate Immunity

Outline of Annual Research Achievements

ブタに導入する予定の遺伝子を用意した。当初予定していたCTDMに代わる新しいハイブリッド分子として、NCTDM (C1-INH + DAF(CD55) + MCP(CD46)= C1DM、さらに一部アミノ酸配列を改変したThrombomodulin、またHLA-Eにmutationを入れブタ細胞での発現を安定なものにしたHLA-Ev147にhuman-microglobulinを2Aシステムで繋いだ構築を完成させた。また、これらに繋ぐpromoterも決定した。
さらに、CD59、EPCR、CD47-PI、CTLA4-Ig、TFPI、等のコンストラクトも確保した。加えて、CD200やPL-SPDも構築し、これらの分子のヒトmacrophageを中心とする制御機能をブタ細胞上で確認した。また、それぞれを繋ぐ2Aのコンストラクトや、繋ぐpromoterも決定した。
加えて、血小板内皮細胞接着分子-1（CD31／PECAM-1：Platelet endothelial cell adhesion molecule-1）、細胞接着に関わる免疫グロブリンスーパーファミリー分子、が種特異性を持ち、ブタの血管内皮に発現させると、ヒトの血小板の攻撃を制御することを新たに突き止め報告した。
また、従来の免疫抑制剤に追加する、あるいは置換するため、新規免疫抑制剤であるPQA-18,及び現在各社で開発中のJAK-3 Inhibitor を用意し、異種移植における主にmacrophageに対する制御作用を中心に比較検討し、これを確認した。

Research Progress Status

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] The novel immunosuppressant prenylated quinolinecarboxylic acid-18 (PQA-18) suppresses macrophage differentiation and cytotoxicity in xenotransplantation (2019)
  • Author(s): Lo Pei-Chi、Maeda Akira、Kodama Tasuku、Takakura Chihiro、Yoneyama Tomohisa、Sakai Rieko、Noguchi Yuki、Matsuura Rei、Eguchi Hiroshi、Matsunami Katsuyoshi、Okuyama Hiroomi、Miyagawa Shuji
  • Journal Title: Immunobiology Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1016/j.imbio.2019.04.003
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Human CD31 on porcine cells suppress xenogeneic neutrophil-mediated cytotoxicity via the inhibition of NETosis (2018)
  • Author(s): Wang Han-Tang、Maeda Akira、Sakai Rieko、Lo Pei-Chi、Takakura Chihiro、Jiaravuthisan Patmika、Mod Shabri Afifah、Matsuura Rei、Kodama Tasuku、Hiwatashi Shohei、Eguchi Hiroshi、Okuyama Hiroomi、Miyagawa Shuji
  • Journal Title: Xenotransplantation Volume: 25 Pages: e12396～e12396
  • DOI: 10.1111/xen.12396
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Immunological Response of Pigs to Human Cells, Including Issues Such as the Production of Natural Antibodies in Newborns (2018)
  • Author(s): Sakai R.、Watanabe M.、Maeda A.、Lo P.C.、Wang H.T.、Matsuura R.、Kodama T.、Eguchi H.、Ueno T.、Inoue R.、Nagashima H.、Okuyama H.、Miyagawa S.
  • Journal Title: Transplantation Proceedings Volume: 50 Pages: 2839～2841
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2018.03.074
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] バイオ人工臓器・細胞の開発 (2018)
  • Author(s): 宮川周士、前田晃、奥山宏臣、長嶋比呂志
  • Organizer: 第63回日本透析医学会学術集会・総会
  • Invited
• [Presentation] ヒトCD31(PECAM1)による好中球誘導異種移植拒絶反応の抑制効果の検討Human CD31 (PECAM1)suppresses the neutrophil-mediated xenogeneic rejection (2018)
  • Author(s): 高倉千裕、王 瀚棠、前田 晃、野口侑記、Lo Pei-Chi、坂井理恵子、松浦 玲、児玉 匡、米山知寿、江口 寛、渡辺将人、長嶋比呂志、奥山宏臣、宮川周士
  • Organizer: 第54回日本移植学会
• [Presentation] PAK-2 inhibitor, PQA-18によるマクロファージ誘導異種移植拒絶反応の抑制効果の検討 (2018)
  • Author(s): Lo Pei-Chi、前田 晃、児玉 匡、坂井理恵子、高倉千裕、米山知寿、松浦 玲、野口侑記、上野豪久、江口 寛、松浪勝義、奥山宏臣 、宮川周士
  • Organizer: 第54回日本移植学会
• [Presentation] 異種移植におけるヒトCD200の好中球誘導拒絶反応の抑制効果の検討 (2018)
  • Author(s): 松浦 玲、前田 晃、Lo Pei-Chi、坂井理恵子、高倉千裕、野口侑記、児玉 匡、江口 寛、渡辺将人、長嶋比呂志、宮川周士、奥山宏臣
  • Organizer: 第54回日本移植学会
• [Presentation] ヒトCD31(PECAM1)によるマクロファージ誘導異種移植拒絶反応の抑制 (2018)
  • Author(s): 野口侑記、前田 晃、児玉 匡、松浦 玲、Lo Pei-Chi、坂井理恵子、高倉千裕、米山知寿、高間勇一、上野豪久，渡辺将人、長嶋比呂志、宮川周士、奥山宏臣
  • Organizer: 第54回日本移植学会
• [Presentation] Human CD31 suppress macrophage-mediated xenogeneic rejection (2018)
  • Author(s): Akira Maeda, Wang Han-Tang, Chihiro Takakura, Rieko Sakai, Pei-Chi Lo, Rei Matsuura, Tasuku Kodama, Shohei Hiwatashi, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
  • Organizer: The Transplantation Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] PQA-18, a novel immunosuppressant, suppresses macrophage differentiation and macrophage-mediated xenogeneic cytotoxicity (2018)
  • Author(s): Pei-Chi Lo, Rieko Sakai, Akira Maeda, Chihiro Takakura, Rei Matsuura, Tasuku Kodama, Shohei Hiwatashi, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
  • Organizer: The Transplantation Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Human CD47 suppresses neutrophil-mediated xenogeneic rejection (2018)
  • Author(s): Rieko Sakai, Pei-Chi Lo, Akira Maeda, Chihiro Takakura, Rei Matsuura, Tasuku Kodama, Shohei Hiwatashi, Hiroshi Eguchi, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
  • Organizer: The Transplantation Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The strategies for preventing the macrophage-mediated rejection in xenotransplantation (2018)
  • Author(s): Akira Maeda, Lo Pei-chi, Rieko Sakai, Yuki Noguchi, Tasuku Kodama, Rei Matsuura, Tomohisa Yoneyama, Chihiro Takakura, Hiroshi Eguchi, Masahito Watanabe, Hiroshi Nagashima, Hiroomi Okuyama, Shuji Miyagawa
  • Organizer: APITA 2019, Asia Pancreas and islet Transplantation Association
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Book] REMINISCENCES OF XENOTRANSPLANTATION STUDIES (2018)
  • Author(s): Shuji Miyagawa
  • Total Pages: 25
  • Publisher: Nova science publisher
  • ISBN: 978-1-53613-945-7