2018 Fiscal Year Annual Research Report
development of safe transplantation method of human iPS cell derived liver organoid through portal vein in pig model
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16H05405
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
村田 聡一郎 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (40436275)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武部 貴則 横浜市立大学, 先端医科学研究センター, 教授 (20612625)
長嶋 比呂志 明治大学, 農学部, 専任教授 (50318664)
谷口 英樹 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (70292555)
絵野沢 伸 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 先端医療開発室, 研究員 (40232962)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 門脈内移植 / 3次元培養 / ヒトiPS細胞 / 中型動物 / 体内動態 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は胎児期の肝臓の発生過程を模倣してヒトiPS細胞由来肝細胞、血管内皮細胞、ヒト間葉系幹細胞を3次元培養したヒトiPSC肝芽を作製し、これを大量に製造して移植することで肝疾患を治療することを目指している。ブタは前臨床のモデルとして人間と同じ手技による治療法の検証を行うことが可能である。本研究ではブタ胎仔から作製した肝芽を門脈より同所性に移植し、移植の安全性と有効性を検討することを目的とする。ブタ胎仔由来肝芽での安全性を確認後、ヒトiPSC肝芽をブタに同所移植して安全性を検討する。
前年度までのブタ胎仔由来肝芽の安全性の検討から、新生仔ブタの麻酔法、周術期管理、ブタ胎仔由来肝芽の作製法、臍静脈を経由して肝臓の特定の部位へ移植する手法が確立できた。今年度はヒトiPSC肝芽の安全性検討を行った。ヒトiPS細胞から内胚葉細胞、血管内皮細胞、間葉系細胞に分化誘導させ、3次元混合培養を行うことによりヒトiPSC肝芽を作製した。前年度のブタ胎仔由来肝芽で安全性が確認された移植方法に従い、臍静脈を経由して肝左葉の門脈内にヒトiPSC肝芽を移植した。移植個数は1x10^8個肝内胚葉細胞/個体とした。新生仔ブタにおいては門脈臍部と下大静脈の間に静脈管の開存が見られることがあるため、全例結紮した。ヒトiPSC肝芽移植中の門脈分枝および門脈本幹の門脈圧変化を検討したところ、いずれも有意な門脈圧上昇は見られなかった。ヒトiPSC肝芽移植後の体内動態をヒトAlu配列のPCRおよび免疫染色にて検討したところ、肝臓以外の肺、心臓、脳、腎臓、脾臓等の臓器にヒト細胞の検出は認められなかった。このことから、ヒトiPSC肝芽の門脈内移植は他臓器移行の抑制効果という観点で非常に安全な手技であると考えられた。
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| Research Progress Status |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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