2016 Fiscal Year Annual Research Report
Cdk6が制御するmicroRNAの探索による骨代謝機構の解明と再生医療への応用
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16H05538
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
小笠原 徹 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (20359623)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森 良之 自治医科大学, 医学部, 教授 (70251296)
筑田 博隆 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (30345219)
緒方 直史 帝京大学, 医学部, 教授 (10361495)
羽毛田 慈之 明海大学, 歯学部, 教授 (90164772)
茂呂 徹 東京大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (20302698)
阿部 雅修 東京大学, 保健・健康推進本部, 講師 (10392333)
藤原 夕子 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50466744)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | microRNA / 細胞周期 / 骨代謝 / 発生・分化 / 再生医学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨代謝メカニズムの解明は、口腔外科学分野において非常に重要な課題である。本研究は研究代表者のこれまでの研究成果の発展形として、Cdk6に制御されるmicroRNAの中で骨代謝・骨格形成において重要な機能を有するものを網羅的に探索することによって、骨代謝制御メカニズムのさらなる理解を深めるとともに、その結果を利用した新規骨再生治療法開発に向けた基礎的検討を行うことを目的として企画された。
まず、Cdk6ノックアウトマウス(Malumbres, Barbacid et al. Cell 2004)由来のプライマリー骨芽細胞を用いたDNAマイクロアレイを複数セット行い、骨芽細胞ではCdk6欠損によって様々な遺伝子発現が変化することを確認した。次に同細胞を用いて抗Cdk6抗体によるクロマチン免疫沈降と次世代シーケンサーによる超高速シーケンス（クロマチン免疫沈降シーケンス）を実施し、1000種類程度のmicroRNA発現制御にCdk6が関与している可能性を見出した。さらに、Cdk6ノックアウトマウス由来のプライマリー骨芽細胞を用いてmicroRNAアレイを実施し、骨芽細胞内のCdk6欠損に対応して発現変動する可能性のあるmicroRNAを網羅的に検索した。DNAマイクロアレイ、microRNAアレイで得られたデータとクロマチン免疫沈降シークエンスの結果をバイオインフォマティクス解析に供し、既知の報告やシグナルネットワークも考慮して、Cdk6に制御されると同時に骨系統細胞分化に関与する可能性のあるmicroRNA群の選択を進め、今後の解析候補分子リストがおおむね完成した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
骨芽細胞を用いたmicroRNAアレイと次世代シーケンサーを利用したクロマチン免疫沈降シーケンスの結果を統合して、今後の解析候補となる分子リストが完成したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
基本となるカタログが出来たので、今後は機能解析を中心に分子の絞込み作業を進め、より一層の研究進展を図る
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Research Products
(1 results)
