2016 Fiscal Year Annual Research Report
マルチファンクショナルセルラーゼによるバイオマス分解能の拡張とバイオ繊維原料生産
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16H06132
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
田中 勉 神戸大学, 工学研究科, 准教授 (90436551)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | バイオリファイナリー / 代謝工学 / 細胞表層提示 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成28年度は表層提示系と代謝工学を組み合わせることにより、ベースとなる菌株の構築を行った。大腸菌、コリネ菌、及び分裂酵母を宿主とし、それぞれに対して表層提示系の構築によるセロビオース資化能、キシロオリゴ糖資化能を付与した。大腸菌及びコリネ菌においては、セロビオース、炭素源として増殖させることができ、また酵母エキス等を含まない完全培地での増殖にも成功した。分裂酵母においては、セロビオース資化能を付与することができた。並行してこれらの微生物に代謝改変を施した。大腸菌及びコリネ菌においてカダベリン生産経路を導入し、炭素フラックスを強化すること、及び副産物の経路を遮断することでその生産量を向上させた。分裂酵母においては乳酸生産経路を導入し、フラックスの強化及びエタノール生産経路の破壊により同様にその生産能を向上させた。並行して遺伝子導入法も最適化を行い、以後の改変を容易にすることができた。この改変株に対し表層提示系を導入することで、セロオリゴ糖からの物質生産を行った。セルラーゼを分泌発現させた場合、培養液中に遊離したグルコースが検出されたことから、セルラーゼの活性は十分であること、及びグルコース取り込みが律速であることが示唆されたが、引き続き検討する余地がある。また、表層提示系を導入した株については、グルコース及びセロビオースの両方においてその炭素収率を向上させることができた。分裂酵母においても、グルコース及びセロビオースからの乳酸生産に成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究計画通り、表層提示系及び代謝改変の両方を施したベースとなる株の作出に成功し、物質生産にも成功していることから、順調に進展しているといえる。以後はこの株をベースに生産量の向上を含めた検討を行う。
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| Strategy for Future Research Activity |
代謝工学と表層工学の融合により生産量を向上させるためのアプローチについて検討を進める。
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