2019 Fiscal Year Annual Research Report
ゲノムに局在するユビキチン様修飾分子Ufm1による生活習慣病防御機構の解明
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16H06221
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
渡部 昌 北海道大学, 医学研究院, 講師 (10632424)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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Keywords | UFM1 |
Outline of Annual Research Achievements |
①前年までに同定していたUFM1化タンパク質Xは、UFM1化を受けるともにUFM1分子そのものと非共有結合的に相互作用していることを確認した。 ②質量分析にてXのUFM1化部位の同定を試みたものの、UFM1化の証拠となるような、Xのリジン残基にValGlyがイソペプチド結合したペプチドを検出することができなかった。 ③上記を受けて、UFM1化部位の絞り込みを行うためにXの欠失変異体を作製してUFM1化アッセイを行ったところ、少なくともXのアミノ末端側のドメインにUFM1化サイトが存在することを見出した。 ④UFM1化タンパク質Xは脂質メディエーターの代謝酵素であったため、ヒト好塩基球細胞株KU812FでUFM1をノックダウンし、ELISA法を用いて代謝産物量の測定を行った。すると、UFM1のノックダウンにより代謝産物量の増加を認めた。UFM1はおそらくXを介して代謝産物の生成に対し抑制的に機能していることが考えられた。 ⑤UFM1化タンパク質XがUFM1化経路を制御する可能性についての検証:UFM1化経路を構成する酵素は、自己UFM1化を受けることが知られている。同定したUFM1化タンパク質XもUFM1化経路を制御する可能性があると考え、細胞内でXをノックダウンし、UFM1抗体によるウエスタンブロット解析により、細胞内UFM1化タンパク質の変化を検討した。しかし、Xのノックダウンにより細胞内UFM1化タンパク質に大きな変化を認めることはなかったため、XはUFM1化経路本体には影響を与えていないものと考えられた。
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Research Progress Status |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] The role of Mediator and Little Elongation Complex in transcription termination2020
Author(s)
Takahashi H, Ranjan A, Chen S, Suzuki H, Shibata M, Hirose T, Hirose H, Sasaki K, Abe R, Chen K, He Y, Zhang Y, Takigawa I, Tsukiyama T, Watanabe M, Fujii S, Iida M, Yamamoto J, Yamaguchi Y, Suzuki Y, Matsumoto M, Nakayama KI, Washburn MP, Saraf A, Florens L, Sato S, TomomoriSato C, Conaway RC, Conaway JW, Hatakeyama S
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Journal Title
Nature Communications
Volume: 11
Pages: 1063
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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