2017 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of robust equal chromosome segregation system by mitotic kinase Aurora A
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16H06635
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
家村 顕自 東北大学, 加齢医学研究所, 助教 (50778058)
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| Project Period (FY) |
2016-08-26 – 2018-03-31
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| Keywords | 動原体 / リン酸化 / 細胞分裂 / 染色体分配 / 染色体動態 / がん / 染色体不安定性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Aurora Aが寄与する堅牢な染色体均等分配システムの分子基盤を解析するために、様々な細胞株におけるAurora A及びその触媒分子TPX2の局在レベルを評価したところ、その局在レベルは正常細胞株と癌細胞株で変化はなかった。また、数種類の細胞株について分裂期中期の染色体動態を観察したところ、観察した全ての癌細胞株において分裂期中期での染色体動態が減弱していることが分かった。そこで、分裂期中期染色体動態と分裂期中期動原体のリン酸化の関連性を検証するために、人為的に分裂期中期染色体動態を抑制もしくは誘導した。その結果、染色体動態を抑制した細胞ではリン酸化が減弱し、染色体動態を誘導した細胞ではリン酸化が亢進した。またこのとき亢進したリン酸化はAurora Aの阻害剤を用いることで抑制できた。以上の結果から、Aurora Aが触媒する分裂期中期動原体のリン酸化は分裂期中期染色体動態に依存していることが示唆された。
分裂期中期動原体のリン酸化に対するAurora Aの機能ドメインを推定するために、前年度作成した時期特異的Aurora A欠損細胞に各種Aurora A変異体を発現させ、分裂期中期動原体のリン酸化状態を評価したところ、紡錘体局在が消失する変異体の発現細胞において分裂期中期動原体のリン酸化が減弱した。この結果から、Aurora Aの紡錘体局在が分裂期中期動原体のリン酸化に必要であることが示唆された。
加えて、分裂期中期動原体におけるAurora Aの基質を同定するために、Aurora Aと同じファミリーに属するAurora Bの基質分子について、リン酸化レベルがAurora A阻害で変化するかどうかを検討した。その結果、検証した分子の大部分のリン酸化は、Aurora A阻害に対して非感受性であったが、1種類の分子の複数箇所のリン酸化がAurora A阻害によって抑制された。以上の結果から、当該分子が分裂期中期動原体におけるAurora Aの基質であることが示唆された。
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| Research Progress Status |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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