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2017 Fiscal Year Annual Research Report

Screening of microorganisms metabolizing lipids aerobically under inhibition of be-ta oxidation and construction of oxidized lipid library

Research Project

Project/Area Number 16H06893
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

竹内 道樹  京都大学, 農学研究科, 特定助教 (40766193)

Project Period (FY) 2016-08-26 – 2018-03-31
Keywords酸化脂質 / 水酸化脂肪酸 / 共役脂肪酸
Outline of Annual Research Achievements

前年度において、好気的に脂質を代謝する菌として、Celluromonas sp. とRhodotorula sp.を見いだしており、これらの菌による脂質代謝産物の同定をGC-MS、LC-MS、NMRを用いて行った。その結果、Celluromonas sp.による生成物は、共役αリノレン酸であることを明らかにした。共役αリノレン酸を生産する微生物としては、乳酸菌などの嫌気性微生物が知られているが、本菌は好気条件下で共役αリノレン酸を生産することから、本菌は新規な酵素を有している可能性が示唆された。また、Rhodotorula sp.による生成物は、ヒドロキシ-α-リノレン酸およびジヒドロキシ-α-リノレン酸であることを明らかにした。
また、乳酸菌由来の酵素を用いて生産できる10-ヒドロキシ脂肪酸や10-オキソ脂肪酸を基質として用い、大豆由来リポキシゲナーゼやBacillus megaterium由来P450 BM3により変換を試みた。その結果、リポキシゲナーゼは作用しなかったが、P450 BM-3は二重結合を有する10-ヒドロキシ脂肪酸や10-オキソ脂肪酸に対して作用し、効率よく二重結合をエポキシ化することを見いだした。生成物の構造は、GC-MSおよびLC-MSを用いて同定した。また、反応生成物は新規な化合物であることを明らかにした。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (2 results)

All 2017

All Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Presentation] Eicosapentaenoic acid conversion by cytochrome P450 BM-3 and its mutants to bio-active epoxide derivatives2017

    • Author(s)
      Michiki Takeuchi, Chihiro Ishikawa, Kazuki Saito, Shigenobu Kishino, Satomi, Takahashi, Jun Ogawa
    • Organizer
      Enzyme Engineering XXIV
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Production of bio-active epoxidized eicosapentaenoic acid with cytochrome P450 BM-3 and its mutants2017

    • Author(s)
      Michiki Takeuchi, Chihiro Ishikawa, Kazuki Saito, Shigenobu Kishino, Satomi, Takahashi, Jun Ogawa
    • Organizer
      The 19th Japanese-German Workshop
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2018-12-17  

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