2016 Fiscal Year Annual Research Report
シロイヌナズナの表皮分化を制御する位置情報伝達経路の解明
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16J00702
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
飯田 浩行 大阪大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)
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Project Period (FY) |
2016-04-22 – 2019-03-31
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Keywords | 位置情報 / 胚発生 / シロイヌナズナ / 表皮 / 植物 |
Outline of Annual Research Achievements |
1)外科的な操作により葉肉細胞を最外層に露出させることで、ATML1プロモーター活性が最外層の葉肉細胞で誘導されること(RISE現象)を昨年度までに明らかにしていた。今年度、RISE現象に十分なプロモーター領域の探索を行った。ATML1プロモーターを連続的に欠失させたマーカー系統を用いた実験から、RISE現象に十分な約300 bpの領域を同定した。 2)ATML1タンパク質の細胞内局在解析から、ATML1の核局在が胚の表皮において抑制されていることが示唆されていた。核局在制御の意義を検証するために、今年度、ATML1タンパク質と転写活性を同時に可視化できる形質転換体を作出した。解析の結果、核のATML1タンパク量と転写活性には正の相関関係があることが分かった。この結果から、核局在制御によりATML1の転写活性化能が調節され得ることが示された。また、より詳細な観察から、ATML1タンパク質の蓄積が胚内部の細胞で転写後に抑制されることを見出した。この抑制も、ATML1の活性を最外層に限定するためのしくみであると考えられる。さらに、転写後調節のメカニズムを理解するために、ATML1のドメイン解析に着手した。現在、ドメインを欠失させたATML1とGFPの融合タンパク質を発現する形質転換体を作出し、観察を行っている。 3)ATML1の上流因子を探索するために、胚致死変異体とATML1のマーカーラインを掛け合わせ、異常な発現パターンを示す変異体の探索を計画していた。今年度、スクリーニングをより素早く行うために、ATML1のマーカーラインに対し変異原処理を行い、変異体を探索した。現在までに約700系統のM1世代の植物を観察し、候補となる53系統の変異体を得た。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成28年度の実験目標はおおむね達成できたため。
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Strategy for Future Research Activity |
今後は300 bpの領域に結合する因子の探索や、得られた変異体の解析から、ATML1の上流因子の同定を試みる。また、ATML1のドメイン解析を行い、転写後調節機構の分子機序を解析する予定である。
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Research Products
(4 results)