2016 Fiscal Year Annual Research Report
The basic research to observe lymphatic vessels and elucidate the process of inflammation and fibrosis in the chronic Lymphedema
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16J03757
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
中島 由加里 金沢大学, 医薬保健学総合研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2016-04-22 – 2019-03-31
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| Keywords | リンパ浮腫 / リンパ節 / リンパ経路 / 集合リンパ管 / Podoplanin |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1.慢性リンパ浮腫モデルを作製するために、雌性・雄性マウスを用い、リンパ節とリンパ管の切除部位を検討した。リンパ管は切除しても再生されてしまうため、リンパ節の切除が適切であることがわかった。マウスの下肢に浮腫を作製するため、下肢の解剖を実施したところ、新たなリンパの経路を発見した。リンパ管の経路に性差はなかった。
2.マウス下肢リンパ浮腫モデルを作製するために、リンパ節切除の部位や組み合わせを変え、モデルの作製を実施した。鼠径リンパ節の切除だけでは、長期間飼育してもリンパはうっ滞しないこと、鼠径周囲のリンパ管は再生することがわかった。本実験では、マウスの下肢を走行するリンパ管ルートを全て遮断したリンパ浮腫モデルが最も浮腫が持続した。現在、組織学的観察を実施し、浮腫性変化が観察されるか検討中である。
3.マウスの集合リンパ管を観察するために、固定方法や包埋方法の条件を検討し、プロトコルが確立できた。集合リンパ管は非常に脆く、パラフィン切片では形態を保持できず、観察できないことが分かった。凍結切片にて試料を薄切し、リンパ管内皮細胞のマーカーであるPodoplanin、LYVE-1の染色を実施したが、非特異的反応が多く、プロトコルを調整しPodoplaninをマーカーとして採用することとした。今後は、集合リンパ管の観察のため、Podoplaninとα-SMAの抗体を用いて二重染色を実施し、リンパ管切除部周囲の新生リンパ管の評価を実施する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
慢性浮腫モデルの作製と集合リンパ管の組織切片作製に予想以上に時間を要したが、モデルの見通しが立ち、組織観察手法はプロトコル確立まで達成した。
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| Strategy for Future Research Activity |
作製した浮腫モデルの組織所見によるが、浮腫組織やリンパ管再生部位で起きている現象を形態学的に明らかにする。それらの組織変化に関連する細胞やサイトカイン等を探り、リンパ管内皮細胞の培養系を確立し、共培養を行い、リンパ浮腫の要因を検討する。
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[Journal Article] Evaluation of the effects of changing Japanese honey to hydrocolloid dressing in the period from inflammatory to proliferative phase on cutaneous wound healing in male mice2017
Author(s)
Mukai K, Komatsu E, Yamanishi M, Hutakuchi M, Kanzaka K, Uno Y, Yamazaki S, Kato S, Yamamoto T, Hattori M, Nakajima Y, Urai T, Asano K, Murakado N, Okuwa M, Nakatani T
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Journal Title
WOUNDS
Volume: 29
Pages: 1-9
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Effects of honeydew honey on wound healing.2016
Author(s)
Yukari Nakajima, Kanae Mukai, Tamae Urai, Kimi Asano, Megumi Ohta, Ikuko Kato, Azusa Kawaguchi, Yui Kinoshita, Yuri Kumagai, Ayaka Sakashita, Takuto Sawazaki, Asuka Yamazaki, Toshio Nakatani
Organizer
5th congress of World Union of Wound Healing Societies
Place of Presentation
Florence, Italy
Year and Date
2016-09-25 – 2016-09-29
Int'l Joint Research
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