2018 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of coenzyme Q10 contents in mitochondrial respiratory supercomplexes
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16K01842
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| Research Institution | Tokyo University of Technology |
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Principal Investigator |
加柴 美里 東京工科大学, 教養学環, 准教授 (80338186)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 順寛 東京工科大学, 応用生物学部, 教授 (60134475) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | コエンザイムQ10 / ミトコンドリア / 呼吸鎖超複合体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ミトコンドリア電子伝達系は呼吸鎖超複合体を形成しており，コエンザイムQ10（CoQ10）もこの中に含まれて存在しているらしい．本研究は，呼吸鎖超複合体に結合して存在しているCoQ10量の定量手法を確立し，呼吸鎖超複合体中のCoQ10量の変動を解析する．
3年目の本年度は初年度と2年度に確立したミトコンドリア呼吸鎖超複合体に含まれるCoQ量の解析手法を応用し，培養細胞のミトコンドリア呼吸鎖複合体に含まれるCoQ量の変動を解析した．測定手法は，具体的には，呼吸鎖超複合体をブルーネイティブ電気泳動（BN-PAGE）にて分離し，複合体画分から有機溶媒を用いてCoQを抽出し，抽出されたCoQをHPLC-ECDにて定量した．HepG2細胞を用いて解析した結果，下記点を明らかにした．
① CoQ合成酵素を阻害すると，まず最初に呼吸鎖超複合体中のCoQ量から減少する．
② CoQ合成を阻害してCoQ値が低下した細胞を作成し，その後，この細胞のCoQ合成を再開させると，呼吸鎖超複合体中のCoQ量からまず増加し，合成酵素阻害以前より高値となった．このことから，生合成されたCoQは，まず呼吸鎖超複合体に運ばれることが示唆された．
③ CoQ結合蛋白質プロサポシンをノックダウンした細胞株では，呼吸鎖超複合体中のCoQ量が低下していた．このことから，プロサポシンが呼吸鎖超複合体へのCoQの輸送に関与していることが示唆された．
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