2016 Fiscal Year Research-status Report
グルコース非依存性がん代謝機構を標的とした小分子阻害剤の開発
| Project/Area Number |
16K01941
|
|---|
| Research Institution | Institute of Physical and Chemical Research |
|---|
Principal Investigator |
川谷 誠 国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 専任研究員 (50391925)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | がん / 代謝 / 阻害剤 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
がんの代謝機構は有望な創薬標的と考えられているが、多様性と適応性に特徴付けられる複雑さゆえ、その全体像は未だ明らかではない。多くのがん細胞は解糖系を亢進してエネルギーや高分子材料を得ているが、興味深いことに、ヒト骨肉腫MG-63細胞はグルコースがなくても増殖することを見出した。そこで本研究は、MG-63細胞の代謝特性を利用して、グルコース非依存的ながん代謝機構を標的とした小分子阻害剤を開発することを目的とする。具体的には、MG-63細胞のグルコース非依存性増殖を選択的に阻害する化合物を探索し、得られたヒット化合物の標的分子を明らかにする。候補化合物を用いてグルコース非依存的ながん特異的代謝機構を明らかにするとともに、候補化合物の抗がん剤としての有用性をin vitroで検証する。本年度は主にアッセイ系の構築と薬剤スクリーニングを実施した。
アッセイ系は、データの安定性や実験の簡便性を考慮して、MG-63細胞を96穴プレートに播種して24時間後にグルコース含有培地（+Glc）あるいはグルコース非含有培地（-Glc）に交換し、その後化合物を添加して72時間後に細胞生存率をWST-8法で測定するプロトコールを構築した。このアッセイ系を用いて、NPDepo化合物ライブラリー16,244化合物をスクリーニングした。その結果、細胞生存率が+Glcで80%以上かつ-Glcで50%以下または+Glcで50%以上かつ-Glcで20%以下をヒットのクライテリアとして、100化合物を取得した。次に、これらのヒット化合物について濃度を細かくふって同様の検討を行い、IC50値が10倍以上の選択活性をクライテリアとして、14化合物を取得した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は主にアッセイ系の構築と薬剤スクリーニングを計画し、当初の予定通り順調に進んだ。アッセイ系は比較的簡便なプロトコールを構築することができ、薬剤スクリーニングもおよそ16,000化合物のスクリーニングが完了して、14化合物のヒットを取得することができた。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は薬剤スクリーニングで得られた14ヒット化合物について高次評価を実施していく予定である。具体的には、細胞外フラックスアナライザーを用いて、各化合物のエネルギー代謝に及ぼす影響を調べる。ヒット化合物のなかには、グルコース存在下に比べグルコース非存在下で数百倍以上の選択毒性を示す化合物もみつかっており、このような高い生物活性を有するヒット化合物を優先的に解析していく予定である。
|
| Causes of Carryover |
薬剤スクリーニングにかかる物品費が当初見込んでいた費用を下回ったため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
この残額は次年度の物品費として使用する予定である。
|
-
-
[Journal Article] Actin-binding protein coronin 1A controls osteoclastic bone resorption by regulating lysosomal secretion of cathepsin K.2017
Author(s)
Ohmae S., Noma N., Toyomoto M., Shinohara M., Takeiri M., Fuji H., Takemoto K., Iwaisako K., Fujita T., Takeda N., Kawatani M., Aoyama M., Hagiwara M., Ishihama Y., and Asagiri M.
-
Journal Title
Sci. Rep.
Volume: 7
Pages: 41710
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
[Journal Article] Proteomic profiling reveals that collismycin A is an iron chelator.2016
Author(s)
Kawatani M., Muroi M., Wada A., Inoue G., Futamura Y., Aono H., Shimizu K., Shimizu T., Igarashi Y., Takahashi-Ando N., and Osada H.
-
Journal Title
Sci. Rep.
Volume: 6
Pages: 38385
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
-
-
-
