2016 Fiscal Year Research-status Report
造血幹細胞移植後の再発を抑制するメカニズムの解明と養子免疫療法への応用
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16K07175
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
川瀬 孝和 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教 (30463194)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
一戸 辰夫 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (80314219)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 細胞免疫療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
次世代シークエンサーとシングルセルソーティング技術を用いて、ヒト末梢血中に存在するT細胞受容体(TCR)のα鎖とβ鎖のペアを網羅的に同定し、機能的解析をおこなう系を確立した。この系ではTCRのレパトアを解析する事により、NGSの強みを生かしたTCRレパトアの網羅的解析に加え、単一T細胞から抽出したcDNAを用いて塩基配列を決定することにより、TCRα鎖, β鎖のペアの同定が可能となる。興味深いTCRに関しては、同定したTCRα鎖, β鎖のペアを非特異的T細胞に遺伝子導入し、抗原特異性の確認、更には機能解析を行う事ができる。
本年度は上記の系を用いてサイトメガロウイルス特異的TCRの詳細な解析を行った。シングルセルソーティング技術を用いてCMV既感染者からCMVpp65 NLV specific TCRαβペア遺伝子を同定し、それらをCMV未感染者の末梢血に遺伝子導入してTCRの機能解析をおこなった。解析した各TCR間には、抗原ペプチドとの結合力に差がみられ、TCRの結合力とそのTCRの頻度に高い正の相関がみられた。次世代シークエンサーを用いたCMV既感染者の末梢血T細胞のクロノタイプ解析で、CMVpp65 NLV抗原刺激により増幅してくるクローンは抗原ペプチドと結合力の強いTCRを発現しているT細胞であり、またこのようなTCRは多くの個人間で共有されやすいことが統計学的な有意差をもって明らかとなった。
このように、機能の高いTCRのデータを蓄積することにより、移植後の免疫モニタリングやTCR遺伝子導入T細胞療法に応用可能である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
T細胞受容体を網羅的に解析し、かつ興味深いT細胞受容体に関して昨日解析を行える系を確立済みであり、サイトメガロウイルスに関する解析を終了している。
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| Strategy for Future Research Activity |
同種抗原特異的T細胞受容体、腫瘍抗原特異的T細胞受容体の解析を進める。さらにこれらのT細胞受容体の交差反応性を検討し、細胞免疫療法への応用が期待できるT細胞受容体のデータベースの構築する。
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| Causes of Carryover |
解析サンプル数が予定より少なかったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
実験系の確立が終了しており、サンプルを順次解析していくために使用予定である。
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[Presentation] 同種造血幹細胞移植後の末梢血免疫再構築におけるshared TCRの優位性.2017
Author(s)
美山貴彦, 川瀬孝和, 田中清人, 柴田真志, 樗木錬, 坂本葵, 土石川佳世, 森岡健彦, 大島久美, 本庶仁子, 田中秀則, 北浦一孝, 鈴木隆二, 一戸辰夫.
Organizer
第39回日本造血細胞移植学会総会
Place of Presentation
島根県松江市
Year and Date
2017-03-03
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[Presentation] 次世代シーケンサーとsingle cell sortingを用いた同種抗原反応性T細胞の網羅的解析と高頻度クローンの同定.2017
Author(s)
川瀬孝和, 坂本葵, 樗木錬, 美山貴彦, Masashi Shibata, 田中清人, 北浦一孝, 大島久美, 浜名洋, 岸裕幸, 葛島清隆, 田中秀則, 鈴木隆二, 一戸辰夫.
Organizer
第39回日本造血細胞移植学会総会
Place of Presentation
島根県松江市
Year and Date
2017-03-03
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[Presentation] サイトメガロウイルス反応性T細胞レパトワ形成に与えるHLA-A*02の影響の次世代シーケンサーを用いた網羅的解析.2016
Author(s)
美山貴彦, 田中清人, 柴田真志, 川瀬孝和, 樗木錬, 坂本葵, 北浦一孝, 大島久美, 浜名洋, 岸裕幸, 葛島清隆, 田中秀則, 鈴木隆二, 一戸辰夫.
Organizer
第25回日本組織適合性学会大会
Place of Presentation
北海道札幌市
Year and Date
2016-10-23
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[Presentation] Stem cell memory T-cells are a reservoir of functional T-cells highly shared among individuals.2016
Author(s)
Takahiko Miyama, Takakaza Kawase, Kazutaka Kitaura, Ren Chishaki, Masashi Shibata, Kumi Oshima, Hiroshi Hamana, Hiroyuki Kishi, Kiyotaka Kuzushima, Hiroh Saji, Ryuji Suzuki, Tatsuo Ichinohe.
Organizer
第78回日本血液学会学術集会
Place of Presentation
神奈川県横浜市
Year and Date
2016-10-14
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[Presentation] 次世代シーケンサーとsingle cell sortingを用いた同種抗原反応性T細胞の網羅的解析.2016
Author(s)
川瀬孝和, 坂本葵, 樗木錬, 美山貴彦, 柴田真志, 田中清人, 北浦一孝, 大島久美, 浜名洋, 岸裕幸, 葛島清隆, 佐治博夫, 鈴木隆二, 一戸辰夫.
Organizer
第20回日本がん免疫学会総会
Place of Presentation
大阪府大阪市
Year and Date
2016-07-28
