2019 Fiscal Year Annual Research Report
Cleavage of EphA2 by MT1-MMP and its participation to drug resistance
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16K07190
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| Research Institution | Kanagawa Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
菊地 慶司 地方独立行政法人神奈川県立病院機構神奈川県立がんセンター(臨床研究所), その他部局等, その他 (90372094)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
星野 大輔 地方独立行政法人神奈川県立病院機構神奈川県立がんセンター(臨床研究所), その他部局等, 副技幹・主任研究員 (30571434)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 薬剤耐性 / MT1-MMP / 細胞接着 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１）大腸がん由来でBRAF変異を有するHT29細胞において、RNA干渉法によりMT1-MMPの発現を抑制したところ、vemurafenibへの感受性が増大したことから、MT1-MMPが抗がん剤への抵抗性に関与している可能性が示された。
２）HT29細胞のvemurafenibに耐性の細胞集団を取得した。耐性細胞においてはEphA2の発現の著しい低下がおこっており、MT1-MMPによって切断されたEphA2がvemurafenibに対する抵抗性に寄与するのかどうかは、当初に計画していたようには明らかにすることはできなかった。
３）collagen-Iを用いた3次元培養においてはHT29細胞の vemurafenibに対する感受性が増加する。一方、HT29細胞ではないがMT1-MMPを高発現しているA431細胞では3次元培養において MT1-MMPの発現が低下することが認められた。これらの結果はMT1-MMPがvemurafenibへの抵抗性に関与する可能性を支持する。
４）３）の分子機序を検討し、活性化した Focal adhesion kinase (FAK) および ErbB family kinase (EGFR, ErbB2, ErbB3)の量(総蛋白質の量および/またはリン酸化の割合)が３次元のcollagen-Iゲルで培養した場合、プラスチック表面で培養した場合に比べ著しく低いことを見出し、さらにFAK阻害剤は単剤ではvemurafenibの作用を増強しないがAfatinibはvemurafenib の作用を増強することを見出した。ErbB family kinase の活性がvemurafenib耐性に関与し、collagen-I ゲルに包埋した場合にはErbB family kinaseの活性が低いためにvemurafenibに対する感受性が高まると考えられる。
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