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2017 Fiscal Year Research-status Report

DNA二本鎖切断修復機構で働くヒトMre11複合体の酵素活性とその制御機構の解析

Research Project

Project/Area Number 16K07255
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

古郡 麻子  大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (90546293)

Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
KeywordsDNA二本鎖切断
Outline of Annual Research Achievements

平成28年度に確立したヒトMre11/Rad50/Nbs1(MRN)複合体のバキュロウイルス発現系およびアフィニティタグを使用した簡便な精製方法を用いて各種変異型ヒトMRN複合体を精製し、酵素活性解析を実施した。また平成29年度の計画に予定した通り、関連タンパク質がMRN複合体のヌクレアーゼ活性に与える影響を調べるため必要なヒトおよび大腸菌等のタンパク質の精製を進めた。得られたタンパク質存在下でのMRN複合体のヌクレアーゼ活性を調べた結果、MRN複合体の活性が有意に促進される条件を見出す成果を得た。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

平成30年1月1日をもって所属研究機関を異動することになり(奈良先端科学技術大学院大学から大阪大学)、必要な研究機器等の移動等を行った。そのため実験計画実施に遅れが生じ、予定していた実験計画のうちいくつかが実施ができなかったことから、計画は当初予定より遅れが生じている。

Strategy for Future Research Activity

計画は予定に比べると遅れているものの、実験系の構築やタンパク質の精製等は順調に進んでおり、実験計画実施自体に多くな問題はないため、今後は予定している実験計画を十分実施できると考えている。

Causes of Carryover

平成30年1月1日を持って所属研究機関を異動することになり、機器の移設や実験系のセットアップ等で実験計画実施に遅れが生じたため、予定していた実験計画のうちいくつかが実施ができなかった。そのため平成29年度中に予定していたより使用した試薬や消耗品の購入量が少なく、次年度使用額が生じた。しかし実験計画実施自体に大きな問題はないため、平成30年度中に残りの実験計画を実施し、予定の額を使用できると考えている。

  • Research Products

    (3 results)

All 2017

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] Collision with duplex DNA renders Escherichia coli DNA polymerase III holoenzyme susceptible to DNA polymerase IV-mediated polymerase switching on the sliding clamp2017

    • Author(s)
      Thanh Thi Le, Asako Furukohri, Masahiro Tatsumi-Akiyama and Hisaji Maki
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: ー

    • DOI

      10.1038/s41598-017-13080-1

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] DSB修復で働くMre11/Rad50複合体の生化学的解析2017

    • Author(s)
      古郡 麻子、 Chew Theng Lim、 David R.F. Leach、 真木 壽治
    • Organizer
      日本遺伝学会第89回大会
    • Invited
  • [Presentation] DNA二本鎖切断修復機構で働くMre11/Rad50/Nbs1複合体の解析2017

    • Author(s)
      古郡 麻子
    • Organizer
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(第40回日本分子生物学会年会)
    • Invited

URL: 

Published: 2018-12-17  

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