2018 Fiscal Year Annual Research Report
Studies on functions of membrane steroid receptors and molecular mechanism of oocyte maturation and ovulation
| Project/Area Number |
16K07419
|
|---|
| Research Institution | Shizuoka University |
|---|
Principal Investigator |
徳元 俊伸 静岡大学, 創造科学技術大学院, 教授 (30273163)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | ステロイド膜受容体 / 卵成熟 / 排卵 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
これまでステロイド膜受容体（mPR）が卵成熟誘起ホルモンの受容体であることをモルフォリノアンチセンスオリゴによるノックダウン実験等により示してきた。しかし、膜受容体の機能については相反する報告もなされ、世界的な議論にあることから遺伝子変異メダカを樹立することで生理機能の証明を目指す。一方、新技術である排卵誘導法を用いて排卵誘導に必要な遺伝子群の同定を目指す。
本年度はこれまで樹立したメダカゲノム中に存在する4種類のmPRの遺伝子変異メダカ系統の4重の変異体の系統樹立を進めると伴に、遺伝子編集技術であるCRISPR/Cas9システムによりゼブラフィッシュを材料として確実な機能欠失系統の樹立を進めた。
一方、当研究室で独自に開発した手法により排卵誘導の鍵遺伝子候補11遺伝子を選択した。これらの候補遺伝子について順次、遺伝子編集技術であるCRISPR/Cas9システムにより機能欠失系統の樹立を進め、全ての遺伝子について変異系統の樹立が出来た。いくつかの系統については表現型解析を開始した。最初に系統樹立に成功したstm遺伝子ノックアウト系統では排卵には異常が見られなかったものの受精率に低下が見られ、stm遺伝子が耳石形成だけでは無く受精にも関与するという新たな知見が得られた。他方、予想外の結果としてstm遺伝子変異系統においても耳石の形態異常は確認されたものの行動には異常が見られないことが明らかとなった。また、pax2a遺伝子ノックアウト系統でも排卵が停止することは無かったが、受精率の低下、受精卵においても発生異常が観察された。pax2aについてもこれまで知られてきた中脳後脳境界における初期発生での機能以外に受精から胞胚形成期の初期段階での機能に関する新たな知見が得られた。
|
Research Products
(6 results)
