2016 Fiscal Year Research-status Report
立体構造から「匂い分子結合タンパク質」の機能を解明し、その応用を目指す
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16K07431
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| Research Institution | Muroran Institute of Technology |
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Principal Investigator |
岩佐 達郎 室蘭工業大学, 工学研究科, 教授 (00133926)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 化学感覚タンパク質 / 匂い分子結合タンパク質 / X 線小角散乱 / 立体構造 / 化学感覚 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、１）溶液中でのCp－Lip1、CSP1 タンパク質の立体構造を明らかにする。２）化学分子結合に伴う立体構造の変化を明らかにする。の二つの項目について研究を進めた。Cp－Lip1 の機能を理解するためには、溶液中の構造を明らかにし、それがどの様に変化するのかを知ることが重要である。そのためにX 線小角散乱測定（SAXS ; smallangle X-ray scattering）（連携研究者；平井光博）をおこなった。高エネ研の放射光共同利用実験に課題申請を行い、2016G683「匂い分子結合タンパク質」のリガンド結合に伴う構造変化と機能の関連」を申請し、実験責任者 岩佐 達郎として採択を受けることができた。２０１６年６月、１０月－１１月、１２月、２０１７年２月の４回にわたりPhoton Factoryで測定を行った。種々のｐHでのCp－Lip1、CSP1 タンパク質の散乱パターン、リガンドが共存する時としない時での散乱等を測定した。結果を解析するため、博士後期の院生を群馬大学の連携研究者；平井光博のもとに２週間派遣し、データ解析、結果の解釈についての議論を行ってきた。それらの成果については２０１７年３月につくば国際会議場で行われた量子ビームサイエンスフェスタにおいて発表した。
北大理学部の出村研究室とNMR 測定の共同研究を開始した。ノン－ラベルでのCp－Lip1、CSP1 タンパク質の測定をおこなったところ、明瞭にピークの分離されたシグナルを得ることができたので、現在は１５Nラベル試料の調製を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は、１）溶液中でのCp－Lip1、CSP1 タンパク質の立体構造を明らかにする。２）化学分子結合に伴う立体構造の変化を明らかにする。の２項目についての研究を進展させることを目的とした。X線小角散乱の手法を用いて、化学感覚タンパク質（CSP)、匂い分子結合タンパク質の小角から広角に渡る散乱パターンをえることができた。また、それらのｐH変化、リガンド結合時の変化についても測定することができた。これらの成果について、５件の国際学会報告、１件の招待講演を行うことができた。論文については現在まとめているところであり、本研究は概ね順調に推移していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
X線小角散乱データを元にした論文をまとめ、発表する。現在２０１７年４月に測定したデータを解析している。また、６月にも測定を予定している。
本年度は、１）化学分子結合に関与し、結合特異性を決定するアミノ酸を明らかにする。ことを目的とし、NMR測定に力を注ぐ。そのため、まず１５Nラベル試料を大量精製し、測定を始めたい。また、アミノ酸変異体を作成し、既存の蛍光測定等の手法からのアプローチも試みる。
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| Causes of Carryover |
海外での国際学会発表の日程が合わず、発表できなかった。消耗品について、予定していたより効率的に使用できたため、殆ど他の経費でカバーできた。人件費、謝金を使用する必要が無かった、などの理由から、次年度使用額が増えた。外注した抗体の作成が予定より長引いたため、これについても次年度の支払いとなった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
本年度は消耗品について他の経費との共用を当てにすることができない。また、謝金等の使用も見込まれる。海外との共同研究、発表も予定しているので、予定通りの使用計画で進める。
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[Journal Article] Simple primary amino amide organocatalyst for enantioselective aldol reactions of isatins with ketones2016
Author(s)
Kimura, J., Reddy, UVS., Kohari, Y., Seki, C., Mawatari, Y., Uwai, K., Okuyama, Y., Kwon, E., Tokiwa, M., Takeshita, M., Iwasa, T., Nakano, H.
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Journal Title
European Journal of Organic Chemistry
Volume: 22
Pages: 3748-3756
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Role of the odorant binding protein of Japanese newt, Cynops pyrrhogaster, examined by two different electrophysiological methods2016
Author(s)
T Nakamura, H Yamakawa, A Nakamura, X Li, K Sawada, T Iwasa
Organizer
The joint meeting of the 22nd International Congress of Zoology and the 87th Meeting of the Zoological Society of Japan
Place of Presentation
Okinawa Convention Center, Okinawa, Japan,
Year and Date
2016-11-17 – 2016-11-18
Int'l Joint Research
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