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2016 Fiscal Year Research-status Report

深海熱水域の未知メタン酸化細菌群:集積培養系から探る生理生態と系統

Research Project

Project/Area Number 16K07498
Research InstitutionJapan Agency for Marine-Earth Science and Technology

Principal Investigator

平山 仙子  国立研究開発法人海洋研究開発機構, 深海・地殻内生物圏研究分野, 主任研究員 (90359167)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 高木 善弘  国立研究開発法人海洋研究開発機構, 深海・地殻内生物圏研究分野, 主任技術研究員 (10399561)
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
Keywordsメタン酸化 / 培養 / 単離 / 深海熱水
Outline of Annual Research Achievements

唯一のエネルギー源としてメタンを供給する連続培養装置を用い、沖縄トラフ深海熱水活動域(水深約1,000 m)試料を接種源として、複数の温度条件下で好気性メタン酸化細菌の集積培養を行った。数ヶ月経過後に培養装置内部に厚く形成された多種混合微生物マットの群集構造を調べるため、次世代シーケンサーを用いた16S rRNA遺伝子アンプリコンのシーケンス解析を行ったところ、非常に多様性の高い微生物マットであることが示唆された。微生物マットの中には、属レベルで新奇且つ多様なGammaproteobacteria綱Methylococcales目細菌がマット全体の20%程度含まれていることが確認され、好気性メタン酸化細菌を一次生産者とする微生物群集の存在が示唆された。また微生物マットの顕微鏡観察から、メタン酸化細菌が非常に活発に分裂している様子も確認された。
この微生物マットからメタン酸化細菌を単離するため、バッチ法による培養実験を試み、新奇培養株2株(IN45株およびIN20株)を単離するに至った。Methylothermaceae科Methylomarinovum属のIN45株は至適生育温度45-50℃、Methylococcaceae科のIN20株は至適生育温度25℃を示し、試験管によるバッチ培養法で良好に生育することから、今後様々な研究に利用可能であると考えている。現在までにこの2株のゲノム解析を終了している。今後データ解析を行い、そこから推察される代謝特性について実験的に確かめるとともに、記載のための分類学的解析を進める。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画通りメタン酸化集積系の群集構造解析を行い、さらにそこから新奇培養株を得ることができたことから、研究は順調に進展していると判断した。

Strategy for Future Research Activity

一つの集積培養系を異なる条件下に置いた際の微生物マット群集構造の変化を明らかにし、その応答から各メタン酸化細菌種の至適生育条件を推察し、それぞれの単離へ向けた生理学的情報を得ることを目指す。またバッチ培養法の改良を行い、単離行程の効率化を模索すると同時に、新たな培養株の取得を試みる。

Causes of Carryover

本研究予算で購入を予定していた試薬・物品等を、他の研究費で購入できることになったため、次年度使用額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

当初の計画では予定していなかった高精度な解析を追加的に行うための経費とする。

  • Research Products

    (3 results)

All 2016

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] The bacteriohopanepolyol inventory of novel aerobic methane oxidising bacteria reveals new biomarker signatures of aerobic methanotrophy in marine systems2016

    • Author(s)
      Rush, D., Osborne, K.A., Birgel D., Kappler A., Hirayama, H., Peckmann, J., Poulton, S.W., Nickel, J.C., Mangelsdorf, K., Kalyuzhnaya, M., Sidgwick, F.R., and Talbot, H.M.
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 11 Pages: -

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0165635

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] 深海性メタン酸化細菌のバイオフィルムにおける遺伝子発現2016

    • Author(s)
      高木 善弘、平山 仙子、阿部 真理子、津田 美和子、高井 研
    • Organizer
      日本微生物生態学会第31回大会
    • Place of Presentation
      横須賀市文化会館(神奈川県横須賀市)
    • Year and Date
      2016-10-23 – 2016-10-24
  • [Presentation] リアクター培養法による深海性メタン酸化細菌の分離培養の試み2016

    • Author(s)
      高木 善弘、平山 仙子、阿部 真理子、津田 美和子
    • Organizer
      第18回マリンバイオテクノロジー学会大会
    • Place of Presentation
      北海道大学(北海道函館市)
    • Year and Date
      2016-05-29

URL: 

Published: 2018-01-16  

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