2018 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of non-self recognition system of F-box gene for pollen in self-incompatibility using citrus doubled haploids.
| Project/Area Number |
16K07599
|
|---|
| Research Institution | University of Miyazaki |
|---|
Principal Investigator |
國武 久登 宮崎大学, 農学部, 教授 (80289628)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | カンキツ / 自家不和合性 / SSR / 花粉 / 液体花粉培養 / 非自己認識 / ハプロタイプ / 倍加半数体 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
高等植物における雄性側自家不和合性は、柱頭や花柱組織内で起こる複合的な生化学現象のため、機序の解明は極めて困難である。我々は、配偶体型の認識機構を有するカンキツにおいて、世界に先駆けて試験管内で和合／不和合の反応を再現できる花粉液体培養モデルシステムを開発した。しかしながら、自家不和合性の原因遺伝子であるＳ遺伝子座の自己・非自己認識機構は不明のままである。そこで、本研究では、成熟花粉の液体培養を行い、Sハプロタイプの異なる花柱粗タンパク質を添加して、不和合・和合反応を評価し、自家不和合関連遺伝子の発現を含めて自己・非自己認識機構を明らかにすることを目的とする。
材料には，‘晩白柚’および倍加半数体を供試した．花粉培養は内田ら（2012）の方法を使用し，マイクロピペットにより単一花粉を採取後，DNAを抽出し，第6連鎖群で3個、それ以外の連鎖群で5個のプライマーを使用し，Multiplex PCRを行った。ジェネティックアナライザで分析し，Gene MapperでSSRマーカーの解析を行った．さらに，それぞれの遺伝子座について1:1に分離するかをχ2検定によって検証した．‘晩白柚’の花粉1粒におけるSSR対立遺伝子の分離について調査したところ，第6連鎖群を含めて7個のプライマーにおいて有意水準5％で染色体モデルと同様の分離比を示すことが明らかになった．しかしながら、特定のS遺伝子座に連鎖したSSRマーカーは見つけられず、花粉の遺伝子型までの成果となった。
次に、カンキツ類において推定されているSハプロタイプについて液体花粉培養による評価を行い、複数の花粉側因子によって花柱S因子が認識されるという考えに基づいて考察したところ、実験結果と一致することが明らかとなった。これからさらなる調査が必要であるが、カンキツ類においても複数の花粉側因子が自家不和合性に関与している可能性が示唆された。
|
Research Products
(5 results)
