2018 Fiscal Year Annual Research Report
Development of alga Chlamydomonas oral administration type vaccine for neosporosis as a model.
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16K08033
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| Research Institution | Nippon Veterinary and Life Science University |
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Principal Investigator |
池 和憲 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 教授 (50159597)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | Neospora caninum / ワクチン / 経口投与 / クラミドモナス / ネオスポラ症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ネオスポラ症は、細胞内寄生原虫Neospora caninum感染に起因する疾患で、牛では母牛における死・流産および先天感染新生牛の神経・筋疾患、犬では幼犬の後駆麻痔を主徴とする進行性の神経・筋疾患である。本症伝播で問題となるのは、 ①非妊娠時の原虫感染による宿主体内での増殖と分布（タキゾイトによる水平感染）、とそれに続く②妊娠時の原虫感染あるいは妊娠等の刺激が誘因となるシスト内原虫（ブラディゾイト）の再活性による垂直感染である。以前の研究で①水平感染に対してはThl型免疫が、②垂直感染に対してはTh2型が有効であることを明らかにし、①に対してはThl型アジュバントを用いた注射型ワクチンが、②に対しては藻類経口投与型試作ワクチンに誘導されたTh2型免疫が効果的であることを明らかにし、経口投与型の藻類ワクチンの可能性を見いだした。
本研究の目的は、クラミドモナスを用いた藻類ワクチンの（a）粘膜アジュバントおよび発現抗原遺伝子のコドンの最適化、（b）宿主藻類培養条件による蛋白発現の最適化、（C）経口投与型ワクチンとしての局所免疫および全身免疫誘導におけるワクチンプログラムの最適化することである。
本年度には以下の検討を行った。1 ワクチン抗原NcSAG1とLT-Bの共発現で発現に偏りが生じる問題で、抗原同士を融合蛋白として発現させる事で、この問題を解決した。2 遺伝子の形質転換クラミドモナスの培養条件の検討では、液相と気相の関係を検討し、概ね液層：気相＝1：3が良好な成育を示す結果を得た。3 ワクチンとしての剤型の検討では、市販の餌と共にペレット状にすることでマウスでは最も良好な結果を得た。4 経口投与型ワクチンとしての簡易評価を行い、全ワクチンプログラムを経口投与とするよりも、最初に注射剤で免疫し、その後経口投与とすることで最も良好な抗体価を維持する結果が得られた。
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