2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of novel biomarkers for therapeutic treatment of brain and renal diabetic diseases by focusing on epithelial-mesenchymal transition
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16K08439
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
齊藤 成 藤田医科大学, 医学部, 講師 (10456444)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
丹生谷 正史 東北医科薬科大学, 医学部, 講師 (00228256)
大野 伸彦 自治医科大学, 医学部, 教授 (10432155)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 新規バイオマーカー / 脳、腎糖尿病疾患 / 上皮間葉転換 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、1.新規治療バイオマーカーの検索 2.うつ病様動物モデルにおける脳機能構造体の破綻と治療法の開発、3.数理モデルを用いた腎臓組織集合管主細胞一次繊毛長のボクセル計測法の開発を行った。
1.高脂肪食負荷マウスにSGLT阻害剤の投与前後での尿中の蛋白質とリン脂質の解析を行った。2Dcleanup kitで尿蛋白を抽出し、２色蛍光標識し、自動２次元電気泳動装置(auto2D)にて分布解析を試みたが、メガリンなどの高分子量領域の分解能が十分で無かったため、質量分析の結果で優位なデータを得られていない。LC-MSを用いて、SGLT阻害剤投与により尿中に排泄されるスフィンゴリン脂質(スフィンゴミエリンとセラミド)を同定した。SGLT阻害剤投与により、腎臓よりスフィンゴミエリンが尿排泄された。スフィンゴミエリンにつく長鎖脂肪酸に着目すると、C22からC24の長鎖脂肪酸が多かった。SGLT阻害剤反応性の新規治療バイオマーカーとして、これらの長鎖脂肪酸を持つスフィンゴミエリンが候補として上がった。2.社会的敗北ストレスモデルを用いて、うつ症状を生じるC57BL6マウス(標準食)の脳梁の電子顕微鏡解析を行った。ミクログリアの活性化を伴う、有髄軸索の脱髄が起きるため、ミクログリア活性を抑えるIL-1bの阻害剤投与により、うつ様症状が改善された。高脂肪食負荷マウスでの検討までは、行えていない。3.糸球体ネフロンと集合管での原尿の流量および流速を算定する、管腔径と一次繊毛の長さおよび彎曲を考慮した数理モデルの構築を行った。従来のレイノルズ流の数理モデル計算式を改変した。集合管の一次繊毛長はSBF-SEMと一次繊毛の免疫染色法(アセチル化チュブリンなど)とレーザー共焦点顕微鏡により一次繊毛長の画像取得を行った。
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