2017 Fiscal Year Research-status Report
ゴルジ装置の多様性と成熟過程：3D-SEM法による下垂体前葉形態ライブラリの構築
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16K08458
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| Research Institution | Asahikawa Medical College |
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Principal Investigator |
甲賀 大輔 旭川医科大学, 医学部, 准教授 (30467071)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ゴルジ装置 / 連続切片SEM法 / Array tomography / 免疫組織化学 / 下垂体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度の研究では、平成28年度に引き続き、成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置の3D微細構造解析を行った。① 免疫組織化学標識を加味した連続切片走査電子顕微鏡(SEM)・3D再構築法によるゴルジ装置全体像の解析:LR white樹脂に包埋した下垂体組織ブロックから、連続超薄切片(500枚以上)を切削した。次に、これらの切片に抗下垂体ホルモン抗体(GH,PRL,LH,TSH,ACTH)と金コロイド標識二次抗体による免疫組織化学標識を施し、各ホルモン産生細胞を同定した上で、連続断層SEM像を撮影した。最後に、撮影した連続断層像から各ホルモン産生細胞のゴルジ装置の全体像やそのほかの細胞小器官の空間的配置を解明した。その結果、下垂体各前葉細胞のゴルジ装置の3D全体像は、細胞種によって多様であることが明らかになった。
また、本年度は発生・成長に伴うゴルジ装置の3D微細構築の成熟過程の解析にも着手することができた。② 標本作製: 8週齢以降の雌雄ウィスター系ラットを掛け合わせ、生後0日から7日までの各日、および成体となる8週までの1週間間隔での下垂体標本を作製した。③ 形態的解析: 現在、連続切片SEM法やSEM-CLEM法など、様々なイメージングアプローチを駆使して、生後発達過程での機能成熟(身長・体重の増加や性成熟)との関連性を念頭に置き、ゴルジ装置の経時的形態変化の解析を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究では、先端的なイメージング技法を駆使して、「ゴルジ装置の多様性と成熟過程」の解析を目的としている。そこで本年度(平成29年度)では、昨年度に続き「成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置3D微細構築の多様性」の解析を行った。具体的には、近年開発に成功した連続超薄切片SEM・3D再構築法に免疫組織化学手法を加味した新たなイメージング技法を用いて、下垂体前葉各ホルモン産生細胞のゴルジ装置の3D全体像を解明した。さらに、発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞のゴルジ装置の形態学的な解析にも着手できており、順調に計画が遂行されている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、引き続き発生・成熟過程に伴うゴルジ装置の3D微細構造の解析を行う予定である。また、昨年度と本年度で得られた下垂体前葉各ホルモン産生細胞のゴルジ装置の多様性に関する論文を投稿する予定である。さらに、SEMによる下垂体前葉細胞の分類に関しても論文を作成・投稿する予定である。
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| Causes of Carryover |
(理由) 論文投稿料として確保していたが、平成29年度内に投稿費の支払いができなかった。
(使用計画) 論文投稿料として使用する。
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Research Products
(9 results)
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[Journal Article] Impaired Processing of Prohormones in Secretogranin III-Null Mice Causes Maladaptation to an Inadequate Diet and Stress2018
Author(s)
Maeda Y, Kudo S, Tsushima K, Sato E, Kubota C, Kayamori A, Bochimoto H, Koga D, Torii S, Gomi H, Watanabe T, Hosaka M
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Journal Title
Endocrinology
Volume: 159
Pages: 1213-1227
DOI
Peer Reviewed
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