2017 Fiscal Year Research-status Report
JSAPによる細胞内輸送制御の破綻に起因する神経細胞死と染色体分配異常の分子機構
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16K08579
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
善岡 克次 金沢大学, がん進展制御研究所, 教授 (60200937)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 染色体 / 足場タンパク質 / 細胞分裂 / 細胞死 / マウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
JSAPタンパク質（JSAP1, JSAP2）は細胞内輸送システムにおいて重要な役割を担うと考えられている。しかし、その詳細については不明な点が多い。本研究は、JSAPによる細胞内輸送制御の破綻がもたらす神経細胞死と細胞分裂異常の分子機構解明を目指している。今年度の研究成果は、以下の通りである。
昨年度、Cre-loxPシステムによりJSAP1,2二重破壊が可能なマウス胚性線維芽細胞（MEF）の解析を行い、JSAP1,2二重欠損細胞では遅滞染色体や染色体橋などの染色体異常が高頻度で観察されることを見出した。今年度はさらに解析を進め、JSAP1,2二重欠損細胞において、染色体異数性が引き起こされることを明らかにした。このようなことから、JSAPはゲノム安定性に関わる新規分子であり、JSAP機能喪失は染色体不安定性を誘導することが強く示唆された。JSAP1,2二重欠損細胞が分裂後、どのような挙動を示すのかを詳しく調べるため、現在、不死化MEFの作製を試みている。また、染色体不安定性（CIN）陰性細胞株HCT116を用いた解析に着手し、JSAP1,2それぞれの単独欠損細胞はCIN陰性であるとの予備的知見も得られた。さらに、分裂期キナーゼPLK1に注目した解析を行い、JSAP1,2二重欠損細胞でのPLK1の細胞内局在は野生型細胞とは異なることを示唆する結果が得られた。一方、JSAP機能喪失によって引き起こされる神経細胞死については、プロテオミクス解析による鍵分子候補の同定を計画しており、現在、その準備を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
JSAP機能喪失が細胞にどのような影響を与えるかを調べ、JSAP欠損細胞において（１）分裂期での染色体分配異常が高頻度に誘発されること、（２）染色体不安定性が誘導されることを明らかにした。また、JSAPは分裂期キナーゼPLK1の細胞内局在制御に関わることを示唆する予備的知見も得ている。一方、JSAP欠失によって誘導される神経細胞死については、その分子メカニズム解明に向けて、キネシンやダイニンモータータンパク質との結合能を欠く変異体を含む、様々なJSAP発現ベクター及び関連遺伝子に対するshRNA発現ベクターを作製するとともに、プロテオミクス解析のための準備を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究はおおむね順調に進展しており、当初の研究計画に沿って研究を推進する予定である。また、研究計画に大きな変更はなく、研究を遂行する上でも特に問題点はない。
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