Search for the roles of modification of nuclear proteins by coagulation factor XIII (plasma transglutaminase)

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K08608
• Research Institution: Yamagata University
• Principal Investigator: 惣宇利 正善 山形大学, 医学部, 准教授 (20292419)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 凝固XIII因子 / トランスグルタミナーゼ / 巨核球分化

Outline of Annual Research Achievements

1.凝固XIII因子Aサブユニット（FXIII-A）の巨核球分化への関与について、野生型、FXIII-A欠損、組織型トランスグルタミナーゼ（TGM2）欠損それぞれのマウスから採取した骨髄細胞をトロンボポエチン（TPO）存在下で３日間培養し、巨核球マーカーであるCD61と前駆細胞のマーカーであるCD117 (c-kit)の抗体を用いてFACS解析を行ったところ、FXIII-A欠損骨髄細胞におけるCD61陽性-CD１１７陽性細胞（巨核球前駆細胞）の出現が野生型およびTGM2欠損細胞と比べて有意に増加することが示され、巨核球分化におけるFXIII-Aの抑制作用が強く示唆された。
2.TPOとともにポリアミン（スペルミン）を添加して１と同様の実験を行ったが、ポリアミンによる巨核球分化への影響は認められなかった。
3.マウス骨髄細胞からTPO存在化で分化誘導し、牛血清アルブミン濃度勾配法で分画回収した巨核球を用いてBAPA取り込み反応を行い、BAPAが取り込まれたタンパク質を質量分析にて解析したところ、FXIII-Aと TGM2それぞれに特異的な基質タンパク質の候補が同定された。ヒト巨核球系培養細胞 MEG-01で同定された基質候補タンパク質について、野生型マウスを含めてマウス巨核球でのアミン付加は確認できなかったが、野生型およびTGM2欠損細胞でアミン未標識の候補タンパク質量が極めて低レベルであったのに対してFXIII-A欠損細胞では比較的高レベルに検出されたことから、巨核球分化段階におけるFXIII-Aによるアミン化を介した分解促進が示唆された。