ストレス応答MAPキナーゼJNKのアレルギー性炎症誘導機構と分子イメージング研究

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K08746
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 豊田 博子 東京医科大学, 医学部, 助手 (80468660)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 矢那瀬 紀子 東京医科大学, 医学部, 講師 (10210303) ; 秦 喜久美 東京医科大学, 医学部, 講師 (30287156) ; 古畑 昌枝 東京医科大学, 医学部, 助手 (90468661)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: ストレス応答性MAPキナーゼ

Outline of Annual Research Achievements

MAPキナーゼカスケードは、生命根幹に必須な細胞内シグナル伝達系であり、中でもJNKなどのストレス誘導性経路は自己免疫疾患やアレルギー性の炎症に関与している。近年、これらに対する治療法としてMAPキナーゼをターゲットとした分子標的療法も開発されているが、その細胞内シグナル伝達系の詳細は不明な点も多い。本研究は、アレルギー誘導に関わる獲得免疫系細胞T細胞でのJNK1/2の機能を、コンディショナル遺伝子欠損マウスを用いた生理学的解析と、JNKおよびMAPキナーゼ制御系分子の細胞内イメージングとの融合研究から明らかにし、JNKの新たな側面と重要性を発見することを目的とする。これまで我々は、JNK1/2のリンパ球における役割として、B細胞抗原受容体（BCR）およびインターフェロンによるアポトーシスの誘導や、この過程におけるJNKのミトコンドリアへの移行とBaxの切断によるアポトーシスの増強などを報告してきた。また、MAPKの制御分子RasGRPが、免疫シナプスを構成しているT細胞シグナルソーム、T細胞受容体（TCR）マイクロクラスターとなることを明らかにした。JNK1/2二重欠損（DKO）マウスは胎生致死のため、我々はJNK1 flox/flox（JNK1 f/f）マウスとJNK2欠損（JNK2-/-）、さらにLck-creトランスジェニック（Lck-cre Tg）マウスを用いてT細胞選択的JNK1/2 DKOマウスを作出した。現在、このマウスのプライマリーT細胞をin vivo、in vitroの実験に用い、JNK1/2 DKO T細胞の生化学的・生理学的機能を検討中である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

Lck-Creを用いたT細胞選択的JNK1/2DKOが非常に生まれにくかったため。

Strategy for Future Research Activity

ヘテロ同士の交配の加増、野生型マウスとのバッククロス等を行い、T細胞選択的JNK1/2DKOマウスの安定的な供給を図っている。進展状況はやや遅れているが、今後は研究計画通りの実験を随時進めていく予定である。

Causes of Carryover

（理由）
細胞分離用マイクロビーズ、蛍光抗体などを購入予定であったが、作出マウスの匹数が少なかったため、新たな購入を見合わせた。　　　　　　　　　　　　　　　（使用計画）
平成29年度繰越分の予算は細胞分離用マイクロビーズ購入等、平成30年度研究計画に組み込んで適正に使用する。