2016 Fiscal Year Research-status Report
MERSコロナウイルスの逆遺伝子操作系の確立と病原性因子の解明
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16K08811
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
神谷 亘 大阪大学, 微生物病研究所, 特任准教授(常勤) (60551421)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | コロナウイルス / 遺伝子操作系 / 組換えウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
コロナウイルスは、家畜および伴侶動物において、神経系・消化器系・呼吸器系疾患を引き起こす感染症である。コロナウイルスは、一般に、その感染宿主域は狭く、固有の動物種のみに感染する。２００２年度に発生した重症急性呼吸器症候群コロナウイルス(SARSコロナウイルス)と２０１２年度に発生している中東呼吸器症候群コロナウイルス(MERSコロナウイルス)はヒトに重篤は肺炎を引き起こす。コロナウイルスはRNAウイルスの中でそのウイルスゲノム長が最長であるのが特徴である。しかしながら、この長鎖のウイルスゲノムのため、ウイルスの遺伝子操作系の取り扱いが困難で煩雑となる。
本研究課題では、MERSコロナウイルスのウイルス学的研究基盤を構築するために、遺伝子操作系の確立を目的としている。該当年度は、Bacterial Artificial Chromosome (BAC)を用いてMERSコロナウイルスの全長遺伝子をもつ感染性cDNAの作製を試みた。BACは長鎖のcDNAを保持するのに優れているベクターであり、また、コピー数が低いため予想しない変異が入ることも少ないと考えられている。
サイトメガロウイルスのプロモータと２５塩基のpolyAの間に、MERSコロナウイルスのcDNAのクローニングを試みた。その後、塩基配列を確認した。作製した感染性cDNAを各種培養細胞にトランスフェクションにて導入し、感染性粒子の回収を試みた。
その結果、培養上清中に十分量の感染性粒子の産生を確認することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
該当年度は研究計画通りに、MERSコロナウイルスの遺伝子操作系の確立に成功した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は作製したMERSコロナウイルスの遺伝子操作系を用いて、非構造蛋白質などの機能解析を行う予定である。
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Research Products
(2 results)
