2016 Fiscal Year Research-status Report
新規腎疾患マーカーとしての血中・尿中アンジオポエチン様蛋白4の解析と治療薬の探索
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16K08931
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
鳥居 国雄 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 主任臨床検査技師 (40534045)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木村 秀樹 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 准教授 (20283187)
岩野 正之 福井大学, 学術研究院医学系部門, 教授 (20275324)
菅谷 健 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 客員教授 (40381561)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | Ａｎｇｐｔｌ4 / 腎疾患 / 糸球体上皮細胞 / 尿細管上皮細胞 / PPAR / 飢餓状態 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1) 健常者における血中・尿中Angptl4の基準範囲設定と臨床規定因子の解析：福井大学医学部職員健診時の採血検体100例でAngptl4を測定した。同検体の一般生化学項目の測定後に、臨床因子との相関を分析する。
2) 腎疾患における血中・尿中Angptl4測定の臨床的意義の解析：蛋白尿(1g/日以上)を呈する腎疾患患者を腎生検で診断した。平成28年度は陰性バリア障害の微小変化型ネフローゼ症候群10例、血管壁障害が存在する増殖性腎炎10例、膜性腎症5例、巣状糸球体硬化症3例を診断し、治療前後の血清、尿を保存した。Angptl4の測定は平成29年度にまとめて実施する。
3)各種培養細胞におけるAngptl4発現動態の解析と発現制御薬の検討：マウス糸球体上皮細胞の培養細胞では、PPAR-dの活性化薬と飢餓状態でAngptl4発現が増強し、ドキソルビシン刺激ではその発現が有意に低下した。マウス近位尿細管上皮細(mProx)では、PPAR-d活性化でAngptl4発現増加を認め、PPAR-a活性化では増加は認めなかった。また、ヒト肝型脂肪酸結合蛋白発現のmProxでは対照のmProxに比して、PPAR-d活性化でのAngptl4発現増加がより高度であった。さらに、ヒト近位尿細管上皮細ではPPAR-dとPPAR-gの活性化と低酸素でAngptl4発現が増加した。
4)マウス組織でのAngptl4発現動態の解析：24時間飢餓状態では、S129マウスの肝・腎組織でのAngptl4発現は著しく増加した。また、PPAR-a欠損マウスではS129マウスに比して食事摂取下では肝・腎組織のAngptl4発現が有意に低下していたが、飢餓状態では、両群マウスともに有意に同程度に増加した。
以上の基礎実験結果より、腎細胞では、PPAR活性化、飢餓状態でAngptl4発現が増強することが判明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
健常人と腎疾患患者の検体でのAngptl4測定と解析が遅れている。健常人では、生化学一般項目の測定が事情で遅れている。また、腎疾患の検体は約100検体が収集できた後に測定する予定としている。
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| Strategy for Future Research Activity |
Angptl4測定済みの健常者検体については、一般生化学項目の測定を急ぐ。また、腎臓内科スタッフと連携して、腎疾患患者の検体の収集を積極的に行う。透析患者の検体は、食事の情報を積極的に収集した後、Angptl4測定を行う予定とする。
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| Causes of Carryover |
約600検体でAngptl4測定をする予定で、ELISAキットの予算を90万としていましたが、100検体のみの測定で費用が著しく減額となりました。また、健常者の一般生化学検査が未実施でこの支出がなかったため、上記の次年度使用額が生じました。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今年度は、健常者の一般生化学検査の実施を急ぎ、また、さらなる健常者検体並びに腎疾患患者検体のAngptl4測定を行いたいと考えています。そのため、解析に必要な検体に関する付随情報を的確に迅速に収集していく予定です。さらに、Angptl4の腎疾患における臨床的意義を検討するために、基礎実験を詳細に進めて行きたいと考えています。
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