2017 Fiscal Year Research-status Report
Ⅱ型アルギナーゼ遺伝子の甲状腺癌抑制効果解明による新規癌リスク評価検査の開発
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16K08971
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
志村 浩己 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (40303416)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 祐子 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (60402038)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 甲状腺癌 / アルギナーゼ / ARG2 / Nkx2-1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１．甲状腺癌細胞におけるNkx2-1強制発現によるarginase遺伝子発現誘導効果の解析
ヒト甲状腺癌培養細胞であるBHP18-21v細胞にアデノウイルスベクターにより転写因子Nkx2-1遺伝子を導入し，強制発現させた結果，arginase(ARG)2遺伝子の発現が最大178倍に増加するのが確認された。その誘導効果は時間依存性であり，遺伝子導入後96時間で最大となった。一方ARG1遺伝子の発現誘導は認められず，ARG2遺伝子特異的な効果であることが確認された。
２．発現誘導されたARG2の甲状腺癌細胞における機能解析
Nkx2-1遺伝子導入によりBHP18-21v細胞はアデノウイルスベクターの濃度依存的に細胞死誘導が認められ，アデノウイルス感染後５日後にはほぼすべての細胞の死滅が観察された。この細胞死誘導効果におけるARG2遺伝子発現の効果を検討するため，ARG2発現アデノウイルスベクターの構築を試みたが，ARG2遺伝子の細胞毒性からか，アデノウイルスベクターの構築は困難であった。そこで，ARG2遺伝子に対するsiRNAを導入し，細胞死有効効果を検討した結果，Annexin V染色およびカスパーゼ活性測定によりアポトーシス細胞のARG2遺伝子発現抑制によるアポトーシスの抑制作用を認めた。従って，Nkx2-1による細胞死誘導効果の少なくとも一部はARG2遺伝子発現誘導によるアポトーシス誘導効果が関与している事が明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ARG2発現アデノウイルスベクターの構築がARG2遺伝子の細胞毒性により困難であったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
ARG2の機能解析にsiRNAが有効であることが判明したため，in vivoの実験に対してはアデノウイルスベクターにARG2遺伝子shRNA発現カセットを挿入に実験を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
平成２９年度に使用したソフトウエア使用代金(41,375円）が次年度引き落としとなっているため。
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[Presentation] Age and gender distribution of thyroid nodular lesions found in thyroid ultrasound examination within three years after the nuclear accident: The Fukushima Health Management Survey.2017
Author(s)
Hiroki Shimura, Tomotaka Sobue, Hideto Takahashi, Seiji Yasumura, Tetsuya Ohira, Akira Ohtsuru, Sanae Midorikawa, Satoru Suzuki, Toshihiko Fukushima, Shinichi Suzuki, Hitoshi Ohto, Shunichi Yamashita
Organizer
87th Annual Meeting of the American Thyroid Association
Int'l Joint Research
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[Presentation] 福島県県民健康調査「甲状腺検査」の先行検査における甲状腺嚢胞と結節の性別および年齢階層別疫学的特徴2017
Author(s)
志村浩己, 祖父江友孝, 緑川早苗, 鈴木悟, 福島俊彦, 松塚崇, 高橋秀人, 安村誠司, 大平哲也, 大戸斉, 大津留晶, 鈴木眞一, 山下俊一
Organizer
第60回日本甲状腺学会学術集会
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[Presentation] 福島県県民健康調査「甲状腺検査」先行検査の二次検査受診者における甲状腺自己抗体と甲状腺機能との関係2017
Author(s)
志村浩己, 鈴木悟, 福島俊彦, 緑川早苗, 松塚崇, 伊藤祐子, 大平哲也, 阿部正文, 大津留晶, 鈴木眞一, 山下俊一
Organizer
第90回日本内分泌学会学術総会
