2016 Fiscal Year Research-status Report
アトピー性皮膚炎の痒みにおけるMrgprの役割の解明
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16K09000
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| Research Institution | Kyoto Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
藤井 正徳 京都薬科大学, 薬学部, 准教授 (40434667)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大矢 進 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (70275147)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 痒み / Mrgpr / アトピー性皮膚炎 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
アトピー性皮膚炎において、痒みは主要な症状であり、慢性的な掻破は皮膚炎の増悪・遷延化に深く関係する。しかし、アトピー性皮膚炎の痒みに対して既存の抗ヒスタミン薬は無効である場合が多く、特効薬は未だ存在しない。最近の研究から、Mas関連Gタンパク質共役受容体 (Mrgpr) がヒスタミン非依存性の痒みを媒介する受容体として機能することが明らかにされている。しかし、アトピー性皮膚炎の様な慢性病態においてMrgprが関与するか否かは不明であり、皮膚中に存在するMrgpr内因性リガンドも未だ同定されていない。本研究の目的は、研究代表者が独自に開発した重度の掻痒様行動を呈する慢性アトピー性皮膚炎マウスモデルを用いて、アトピー性皮膚炎の痒みにおけるMrgprの役割を解明することである。具体的には、１）Mrgpr発現神経欠損の掻痒行動に及ぼす影響、２）内因性Mrgprリガンドの探索、３）一次知覚神経等を用いたMrgpr応答性解析について検討を行う。当該年度では、１）研究代表者が所属する実験動物研究施設にMrgprA3-Creマウスを新たに導入した。２）特殊飼料により全身性にドライスキンを発症したヘアレスマウスにダニ抗原を長期間塗布することにより作成したアトピー性皮膚炎掻痒モデルから皮膚組織抽出液を回収し、他のマウスに皮内投与したところ掻痒行動が起こることを見出した。３）正常マウス及びアトピーモデルマウスより脊髄後根神経節（DRG）細胞を採取し、Ca2+イメージングにより、クロロキン (MrgprA3アゴニスト) 及ひSLIGRL (MrgprC11及びPAR2アゴニスト) の反応性を調べたところ、両マウス間で顕著な差は認められなかった。一方、アトピー性皮膚炎の治療薬であるtacrolimusがDRG細胞におけるクロロキンによるCa2+流入を抑制することを見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
MrgprA3-Creマウスを新たに導入するための凍結胚から個体への復元作業にやや時間がかかっているが、病態モデルマウスから皮膚組織抽出液中に何らかの痒み活性物質がある興味深い知見を見いだすことができた。また、DRG細胞を用いた検討では、正常マウスと病態マウスの間でMrgprアゴニストによる反応性に差を見出すことはできなかったが、別の検討からMrgprA3を介する反応をtacrolimusが抑制する新しい知見を見出すことができており、全体を通して概ね順調に研究が進展していると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
１）の検討として、MrgprA3発現神経の分布及び本神経を特異的に消失させる目的で、それぞれROSA26tdtomatoマウス及びROSA26DTRマウスを導入し、MrgprA3-Creマウスと交配させる。２）病態マウス由来皮膚抽出成分がDRG細胞を活性化するか否か、また、MrgprA3もしくはMrgprC11を強制発現させた細胞株を確立する。３）Tacrolimusによるクロロキン誘発DRG細胞活性化抑制メカニズムを薬理学的に解析する。
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| Causes of Carryover |
当初の計画では、当該年度においてMrgpr強制発現細胞系を確立する予定であったが、本実験計画を平成２９年度に実施することに変更したため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
当初の計画に加えて、Mrgpr強制発現細胞系を確立する検討を行う。
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Research Products
(8 results)
