2017 Fiscal Year Research-status Report
C末端欠損HBｘ遺伝子インテグレーションによる肝発癌・悪性化機構の検討
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16K09334
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
須田 剛生 北海道大学, 大学病院, 特任助教 (20447460)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂本 直哉 北海道大学, 医学研究院, 教授 (10334418)
森川 賢一 北海道大学, 大学病院, 助教 (60384377)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 肝癌幹細胞 / HBV |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HBVウイルスは複製過程で逆転写反応によりウイルスDNAを合成し宿主ゲノムへと組み込まれゲノムインテグレーションが起こる。HBV肝細胞癌の約90%の症例で組込みが確認され発がんに関与する事が推定される。近年のHBV肝癌のホールゲノム解析により、HBx遺伝子の3’末端の欠失した欠損体が多く発現している事が報告されている（Nature Genetics 2012）。しかしながら、C末端欠損HBx遺伝子ゲノムインテグレーションの癌悪性化機構は十分に明らかとなっていない。そこで、癌の薬剤耐性、再発との関与も指摘されるcancer stem like cells (CSCs)に C末端欠損HBx遺伝子ゲノムインテグレーションが与える影響について検討した。
そこで、C末端欠損HBx恒常発現細胞を構築し検討した。同細胞は、抗ガン剤耐性で高い腫瘍形成能が確認され、癌幹細胞マーカーであるCD133,CD44の発現上昇を認め、特にCD44の発現上昇が顕著であった。
続いて、Human Stem Cell PCR Array (Qiagen)を用いて検討で、C末端欠損HBx発現細胞ではLTBP1(Latent transforming growth factor-beta 1 binding protein)が高発現し、蛋白レベルでも発現上昇している事が確認された。更にLTBP1をサイレシングするとC末端欠損HBx細胞はCD44の発現が低下し抗癌剤に対する耐性が確認された。また、プロモーターアッセイの結果、C末端欠損HBxはLTBP1のスプライシングバリアントであるLTBP1Sを誘導する事が明らかとなった。
HBx C末端欠損細胞をマウスの皮下に移植したゼノグラフトモデルにおいて、in vivo においてもHBｘC末端欠損細胞はコントロール細胞と比して高い腫瘍形成能を有する事を確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
in vitroでの検討に加えて、動物モデルにおける進捗も順調である為
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| Strategy for Future Research Activity |
１ ゼノグラフトモデルにて、高い腫瘍形成能が明らかとなったC末端欠損HBｘ発現腫瘍細胞の抗癌剤耐性能の検討を行う。更に、腫瘍細胞における各種肝癌幹細胞マーカー、LTBP-1発現の検討、抗がん剤投与後の検討を行う。今年度は、新規に臨床追うよされたレンバチニブやレゴラフェニブに対する感受性も検討する
２ LTBP-1は血清蛋白であり、測定が可能である。最近、他グループよりLTBP-1値が肝線維化と相関する事が報告された。我々の検討では、血清LTBP-1量とB型肝癌に対する肝動注療法の治療効果との相関がみられる事が明らかとなった。次年度は、更に多数例での検討を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
動物実験の進捗が、予想より時間がかかった為。それに伴い、予定していた学会発表を次年度としたため。来年度、初期に同実験とそれについての学会発表を行う予定としている
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[Journal Article] Safety and efficacy of sofosbuvir and ribavirin for genotype 2 hepatitis C Japanese patients with renal dysfunction2018
Author(s)
Sho T, Suda G,, Nagasaka A, Yamamoto Y, Furuya K, Kumagai K, Uebayashi M, Terashita K, Kobayashi T, Tsunematsu I, Onodera M, Meguro T, Kimura M, Ito J, Umemura M, Izumi T, Kawagishi N, Ohara M, Ono Y, Nakai M, Natsuizaka M, Morikawa K, Ogawa K, Sakamoto N
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Journal Title
Heptology Research
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Increased serum C-reactive protein and decreased urinary aquaporin 2 levels are predictive of the efficacy of tolvaptan in patients with liver cirrhosis2018
Author(s)
3.Nakai M, Ogawa K, Takeda R, Ohara M, Kawagishi N, Izumi T, Umemura M, Ito J, Sho T, Suda G, Morikawa K, Sakamoto N
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Journal Title
Hepatolgy Research
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Hepatitis B virus reactivation during hepatitis C direct-acting antiviral therapy in patients with previous HBV infection2017
Author(s)
Kawagishi N, Suda G, Onozawa M, Kimura M, Maehara O, Ito J, Nakai M, Sho T, Natsuizaka M, Morikawa K, Ogawa K, Sakamoto N
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Journal Title
Journal of Hepatology
Volume: 67
Pages: 1098-1106
DOI
Peer Reviewed
