2017 Fiscal Year Research-status Report
肝細胞癌におけるGal-9のエクソソームを標的とした治療戦略のための基礎的研究
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16K09361
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| Research Institution | Kagawa University |
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Principal Investigator |
正木 勉 香川大学, 医学部, 教授 (30335848)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷 丈二 香川大学, 医学部, 協力研究員 (00596075)
小原 英幹 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (10612476)
岩間 久和 香川大学, 総合生命科学研究センター, 准教授 (20398035)
森 宏仁 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (20568844)
藤田 浩二 香川大学, 医学部附属病院, 病院助教 (50749421)
森下 朝洋 香川大学, 医学部附属病院, その他 (60423430)
野村 貴子 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (70645415)
米山 弘人 香川大学, 医学部, 助教 (80294750)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 肝細胞癌 / Ｇａｌ-9 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々が、見出した新しい生理活性物質ガレクチン-９(Gal-9)が、肝細胞癌に対して、抗腫瘍効果があることを示し、その機構としてGal-9が腫瘍細胞内・組織内のmicroRNAを変化させることにより、抗癌作用を有することを証明してきた。まず、昨年度は、Gal-9が、肝細胞癌、胆管細胞癌のみならず、他の消化器癌においても、抗腫瘍効果を持つことを調べた。その理由として本研究の目的である、Gal-9の肝癌の増殖抑制作用によってエクソソーム(細胞外分泌小胞) microRNAの変化が同じであるかどうかを検索したいためである。
①Gal-9の投与により、肝がん細胞株のエキソソーム内に特異的に発現増強、減弱するマイクロRNAのターゲット遺伝子予測 Gal-9の投与によって、エクソソーム内microRNAが、ターゲット分子を制御するかを予測検討する。Gal-9投与により、肝癌細胞抑制効果に関連するエクソソームmicroRNAのターゲット遺伝子の実験的確証実験を行う。さらに、癌細胞抑制効果に関連するエクソソームmicroRNAの機能解析をGal-9において癌抑制効果に関連すると予測されたmicroRNAをリポソーム法によりその合成マイクロRNA前駆体分子あるいは、マイクロRNA活性を下げる合成マイクロRNA阻害分子を癌細胞内に導入し、細胞増殖能、アポトーシスの誘導を観察する。
②エキソソームの細胞外の放出 Gal-9の添加の有無によるエクソソームの放出量を単離されたタンパク量で比較検討する。
③細胞内への取り込み実験
肝癌細胞株Huh-7から単離したエクソソームを蛍光色素PKH26(赤)で標識し、24時間後、培養中の正常肝細胞(hNHeps), Huh-7に添加し、蛍光顕微鏡で観察し、どちらの細胞に取り込みやすいのか検討する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Gal-9の抗腫瘍性効果が肝癌細胞から放出されたエクソソーム内のmicroRNAの発現動態に関与し、それらのmicroRNAが Gal-9の癌抑制機構に関連しているのかの検討を行った。現在、胆管細胞癌HuCCT-1( Gal-9抗腫瘍効果を示す細胞株)のエキソソームの単離に成功し、Gal-９投与・非投与によってそのエクソソーム内の、2555種類のマイクロRNAの発現プロファイリングのパイロットスタディーを行ったところ、Gal-9の投与・非投与のマイクロRNAのプロファイリングは明確に異なることが判明した。
さらに肝癌においても同様な検討を行い、胆管細胞癌と共通しているmicroRNAをPCRで確認作業を行った。さらに、膵癌などの研究も行い、論文作業をしている。
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| Strategy for Future Research Activity |
①平成28年、29年で遂行できなかった実験を行う。
②慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌患者における血清中のエクソソームのmicroRNAの網羅的解析を行い、臨床パラメーターとの関連性を検討。各々の病態のサンプル数は、治療前の20症例を行い、各病態におけるバイオマ-カ-の絞り込みを行う。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] icroRNA profile of hepatic epithelioid hemangioendothelioma: A case report.2017
Author(s)
Morishita A, Iwama H, Yoneyama H, Sakamoto T, Fujita K, Nomura T, Tani J, Miyoshi H, Fujihara S, Nishiyama N, Kobara H, Mori H, Yamamoto N, Okano K, Suzuki Y, Ibuki E, Haba R, Himoto T, Masaki T.
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Journal Title
Oncol Lett
Volume: 13(3)
Pages: 1655-1659
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Therapeutic potential of the antidiabetic drug metformin in small bowel adenocarcinoma.2017
Author(s)
Chiyo T, Kato K, Iwama H, Fujihara S, Fujita K, Tadokoro T, Ohura K, Samukawa E, Yamana Y, Kobayashi N, Matsunaga T, Nishiyama N, Ayaki M, Yachida T, Morishita A, Kobara H, Mori H, Masaki T.
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Journal Title
Int J Oncol
Volume: 50(6)
Pages: 2145-2153
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Effects of galectin-9 on apoptosis, cell cycle and autophagy in human esophageal adenocarcinoma cells.2017
Author(s)
Akashi E, Fujihara S, Morishita A, Tadokoro T, Chiyo T, Fujikawa K, Kobara H, Mori H, Iwama H, Okano K, Suzuki Y, Niki T, Hirashima M, Masaki T.
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Journal Title
Oncol Rep
Volume: 38(1)
Pages: 506-514
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Galectin-9 ameliorates fulminant liver injury.2017
Author(s)
Tadokoro T, Morishita A, Sakamoto T, Fujihara S, Fujita K, Mimura S, Oura K, Nomura T, Tani J, Yoneyama H, Iwama H, Himoto T, Niki T, Hirashima M, Masaki T
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Journal Title
Mol Med Rep
Volume: 16(1)
Pages: 36-42
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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