Basic study on treatment of hepatocellular carcinoma targetted of Gal-9 exosomes

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K09361
• Research Institution: Kagawa University
• Principal Investigator: 正木 勉 香川大学, 医学部, 教授 (30335848)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 谷 丈二 香川大学, 医学部, 協力研究員 (00596075) ; 小原 英幹 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (10612476) ; 岩間 久和 香川大学, 総合生命科学研究センター, 准教授 (20398035) ; 森 宏仁 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (20568844) ; 藤田 浩二 香川大学, 医学部附属病院, 病院助教 (50749421) ; 森下 朝洋 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (60423430) ; 野村 貴子 香川大学, 医学部, 助教 (70645415) ; 米山 弘人 香川大学, 医学部, 助教 (80294750)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 肝細胞癌 / Ｇａｌ－９

Outline of Annual Research Achievements

Gal-9の非添加、添加のGal-9感受性細胞(Li-7,HLE,HLF)と耐性性細胞(HuH-7,HepG2, Hep3B) における培養溶液中のエクソソームの単離及びsmall RNAを含むtotal RNAの抽出した。Gal -9 の添加により、により、microRNAオリゴチップ（東レ,Human miRNA Oligo 4 arrays ver.21）を用いた、エクソソーム内microRNAの網羅的解析により、miR-34が、Gal-9感受性細胞(Li-7,HLE,HLF)において、増加していた。miR-34は、肝病態の進行に伴い、血清中のエクソソーム内において増量していた。さらに、miR-34に、miR-34を遺伝子導入すると細胞増殖抑制作用を示し、さらに、細胞周期のG1期からS期に誘導するCyclin D1の減弱が認められた。このことから、Gal-9は、エクソソーム内のmiR-34を増加させ、細胞増殖の抑制に関与していることが判明した。
また、肝癌細胞株Huh-7の培養液から単離したエクソソームを蛍光色素PKH26(赤)で標識し、24時間後、培養中の正常肝細胞(hNHeps), Huh-7に添加し、蛍光顕微鏡で観察し、どちらの細胞に取り込みやすいのか検討した。正常細胞にも癌細胞にも取り込まれ癌の悪性化癌の増殖に関連があると考えられる。これらのことから、癌細胞から放出されたエクソソーム内に癌細胞の進展、増殖効果が認められることが判明した。

Research Products

• [Journal Article] Human microRNAs preferentially target genes with intermediate levels of expression and its formation by mammalian evolution. (2018)
  • Author(s): Iwama H, Kato K, Imachi H, Murao K, Masaki T.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 13(5) Pages: e0198142
  • DOI: 10.1371
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] MicroRNAs as possible biomarkers for hepatocellular carcinoma. (2018)
  • Author(s): Morishita A, Masaki T.
  • Journal Title: Hepatol Res Volume: 48 Pages: 499-501
  • DOI: 10.1111
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Serum miRNAs Predicting Sustained HBs Antigen Reduction 48 Weeks after Pegylated Interferon Therapy in HBe Antigen-Negative Patients. (2018)
  • Author(s): Fujita K, Mimura S, Iwama H, Nakahara M, Oura K, Tadokoro T, Nomura T, Tani J, Yoneyama H, Morishita A, Oryu M, Himoto T, Nishitsuji H, Shimotohno K, Omata M, Masaki T.
  • Journal Title: Int J Mol Sci Volume: 19(7) Pages: E1940
  • DOI: 10.3390
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Fibrosis Staging Using Direct Serum Biomarkers is Influenced by Hepatitis Activity Grading in Hepatitis C Virus Infection. (2018)
  • Author(s): Fujita K, Kuroda N, Morishita A, Oura K, Tadokoro T, Nomura T, Yoneyama H, Arai T, Himoto T, Watanabe S, Masaki T.
  • Journal Title: J Clin Med Volume: 7 Pages: E267
  • DOI: 10.3390
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 慢性肝疾患における血清ガレクチン9濃度の診断的意義の検討 (2018)
  • Author(s): 藤田浩二、樋本尚志、正木 勉
  • Organizer: 第104回日本消化器病学会総会
• [Presentation] ソラフェニブ抵抗性肝細胞癌に対する新規治療薬としてのマイクロRNAの有効性 (2018)
  • Author(s): 森下朝洋、谷 丈二、正木 勉
  • Organizer: 第22回日本肝臓学会大会
• [Presentation] miR-762はDAA治療経過中のゲノタイプ1型HCV排除に際して血清中に増加する (2018)
  • Author(s): 米山弘人、森下朝洋、藤田浩二、野村貴子、坂本鉄平、田所智子、大浦杏子、谷 丈二、出口章広、樋本尚志、三村志麻、正木 勉
  • Organizer: 第22回日本肝臓学会大会
• [Presentation] C型肝炎起因性肝細胞癌におけるバイオマーカーとしての血清miR-125a-5pの有用性 (2018)
  • Author(s): 大浦杏子、田所智子、藤田浩二、三村志麻、坂本鉄平、野村貴子、森下朝洋、米山弘人、正木 勉
  • Organizer: 第22回日本肝臓学会大会
• [Presentation] 食道腺癌におけるガレクチン9の増殖抑制効果の検討 (2018)
  • Author(s): 明石瑛美子、藤原新太郎、森下朝洋、田所智子、千代大翔、正木 勉
  • Organizer: 第60回日本消化器病学会大会
• [Presentation] 膵臓癌に対する術前化学放射線療法におけるmicroRNAの網羅的解析を用いた治療効果判定の検討 (2018)
  • Author(s): 加藤清仁、鎌田英紀、波間大輔、山名浩喜、辻真一郎、山下拓磨、小林聖幸、藤森崇行、正木 勉
  • Organizer: 第60回日本消化器病学会大会
• [Presentation] 炎症性腸疾患の診断、鑑別における血清microRNA のバイオマーカーとしての同定 (2018)
  • Author(s): 谷内田達夫、藤森絢子、小林伸也、千代大翔、西山典子、小原英幹、森 宏仁、岩間久和、舛形 尚、正木 勉
  • Organizer: 第110回日本消化器病学会四国支部例会・第121回日本消化器内視鏡学会四国支部例会