2016 Fiscal Year Research-status Report
肝癌由来増殖因子とヌクレオリンの機能解析による新たな肝癌治療の開発
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16K09383
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
榎本 平之 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (40449880)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西口 修平 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (10192246)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | HDGF / 肝細胞癌 / Nucleolin / Sorafenib / アレイシステム / microRNA / Xenograft model / 細胞増殖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. HDGFの肝癌増殖作用に関するmicro RNA解析：肝癌細胞株SK-Hep1およびHepG2細胞に対してrecombinant HDGFタンパクの添加によって増殖刺激を加え、その後アレイシステムを用いてHDGFの作用によって誘導あるいは抑制されるmicroRNAの候補を同定した。今後HDGFの刺激によるmRNAの変動についてもアレイシステムで検討を行う。最終的にはmicroRNAとmRNAの変動の統合解析により、HDGFの標的となる分子を絞り込み、最終的に肝癌増殖抑制の機序解明に貢献することが期待できる。
2. HDGF抑制とSorafenibの併用による肝癌増殖抑制の検討： われわれはHDGFを抑制することでVEGFの発現が抑制され、更に血管新生の抑制と抗腫瘍効果を生じることを明らかにした。またSK-Hep1細胞を用いてHDGFの発現抑制株にSorafenibを作用させる実験を行い、Sorafenibの肝癌増殖抑制効果をin vitroにおいて増強しうることを見出している。HDGFの発現を抑制したSK-Hep1肝癌細胞株とコントロール細胞をヌードマウスに移植し、Sorafenibを投与してin vivoにおける腫瘍増殖抑制効果を比較するモデルを用い、採取されたサンプルの解析を開始した。肝癌治療に対するHDGF 抑制の効果を検討するために重要である。
3. Nucleolin (NCL) と肝癌増殖に関する解析：NCL はHDGFの結合タンパクの可能性が考えられている。肝癌細胞株におけるNCLの発現について、複数の肝癌細胞株で検討した。HDGFによる肝癌増殖の機序解明のために重要である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
アレイシステムにより肝癌細胞株においてHDGFタンパクによって誘導あるいは抑制されるmicroRNAの候補を明らかにすることができた。またHDGF抑制とSorafenibの併用による肝癌増殖抑制の検討では、in vivo実験での腫瘍のサンプルを採取して、解析を開始することができた。以上に加えHDGFの結合タンパクとされるNCLについて、肝癌細胞株での発現検討を行うこともできた。これらの結果から、おおむね順調に成果が得られたと考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
HDGFの作用によって誘導あるいは抑制されるmicroRNAの候補を同定した。今後HDGFの作用で変動するmRNAについてもアレイシステムで検討を行う。最終的にはmicroRNAとmRNAの変動の統合解析により、HDGFの発現抑制による肝癌増殖抑制の標的を同定につなげたいと考えている。
NCLの中和抗体の販売が中止となり、現在入手困難となった。しかしながら免疫染色やウエスタン・ブロットで使用可能な抗体は入手可能であるため、これらを用いてNCLの肝癌増殖における役割を検討する。
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| Causes of Carryover |
ヌクレオリン中和抗体の販売中止などのため、一部支出が予定より少なくなった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
近年の論文発表においては、広い結果の公開のために著者が出版費を負担するオープン・アクセスが主流となっている。当初から予定している実験に加え、論文出版などに使用する予定である。
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