Analysis of histone modification system that governs the progression of pancreatic oncogenesis

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K09390
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 立石 敬介 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (20396948)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中井 陽介 東京大学, 医学部附属病院, その他 (80466755) ; 水野 卓 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30771050)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 膵癌

Outline of Annual Research Achievements

P48Cre:KrasG12Dマウスは生後早期からPanIN 病変を呈し、一年以上の経過で膵癌に進展する。このマウスとヒストンメチル化酵素のKOマウスとを交配し膵癌発生進展への過程を検討した結果、ヒストンメチル化酵素Ehmt 欠損マウスでは膵癌前駆病変の進行が遅延することを明らかにした。通常のEhmt存在下では生後早期よりmetaplasia からPanIN 形成を呈し、生後一年までにはPanINが進行、さらに一年以上経過すると膵癌で死亡するマウスが出現、その生存日数中央値は353日であった。一方でEhmt欠損マウスでは生存日数中央値は602日と、ほぼ通常の野生型マウスと同様であった。組織学的検討により、Ehmt欠損マウスではmetaplasia と早期のPanIN病変は見られるが以降のPanIN病変が形成されないことが明らかとなった。これらのデータはEhmtがマウス膵においてKras遺伝子変異存在下での腫瘍発生に重要な役割を果たしていることを示唆する。
P48Cre:KrasG12D Ehmt 野生型あるいはEhmt 欠損マウスの膵metaplasia 病変において、Sox9, Mint, Ck19, Amylaseの発現パターンについて、定量的RT-PCRと免疫染色を用いて検討した。さらにP48Cre:KrasG12D マウスにおけるPanIN 進行は炎症により促進されることから、セルレインを生後6－8週程度のP48Cre:KrasG12D Ehmt 野生型あるいはEhmt 欠損マウスに投与し膵の炎症を誘導した後、PanIN 病変の進行状況を解析した。これによりEhmt が炎症による前癌病変進行に役割を持ちうるかどうかの評価を行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

P48Cre:KrasG12D Ehmt 野生型あるいはEhmt 欠損マウスの膵metaplasia 病変において、Sox9, Mint, Ck19, Amylaseの発現パターンについて、定量的RT-PCRと免疫染色を用いて検討した。さらにP48Cre:KrasG12D マウスにおけるPanIN 進行は炎症により促進されることから、セルレインを生後6－8週程度のP48Cre:KrasG12D Ehmt 野生型あるいはEhmt 欠損マウスに投与し膵の炎症を誘導した後、PanIN 病変の進行状況を解析した。これによりEhmt が炎症による前癌病変進行に役割を持ちうるかどうかの評価を行った。

Strategy for Future Research Activity

P48Cre:KrasG12D Ehmt 野生型あるいはEhmt 欠損マウスの膵組織それぞれからRNA を抽出し、発現アレイにて両者において異なる遺伝子発現プロファイルの網羅的解析を行う。これによりまずはヒストンメチル化酵素Ehmtの発現制御をうける遺伝子群あるいは特異的なシグナル伝達経路を明らかにする。その後validation によりその変動が確認された遺伝子については各grade のPanIN における発現状態の変化を免疫組織染色でも検討する。

Causes of Carryover

購入額に174円の端数が生じたため

Research Products

• [Journal Article] Prevalence of Pancreatic Cystic Lesions Is Associated With Diabetes Mellitus and Obesity: An Analysis of 5296 individuals Who Underwent a Preventive Medical Examination. (2017)
  • Author(s): 3)Mizuno S, Isayama H, Nakai Y, Yoshikawa T, Ishigaki K, Matsubara S, Yamamoto N, Ijichi H, Tateishi K, Tada M, Hayashi N, Koike K.
  • Journal Title: Pancreas Volume: 46(6) Pages: 801-805
  • DOI: doi: 10.1097/MPA.0000000000000833.
  • Peer Reviewed