The development of new antibody treatment against immune checkpoint protein PD-1 homolog

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K09587
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 原田 紀宏 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10465065)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 免疫チェックポイント分子 / 補助シグナル / 肺がん / 喘息

Outline of Annual Research Achievements

免疫は、過度の免疫反応を抑制するシステムを有し、主に抑制性の補助シグナル分子によって機能している。この抑制性補助シグナル分子を免疫チェックポイント分子と呼び、現在、CTLA-4、PD-1とそのリガンドPD-L1の抗体製剤を使用することができる。呼吸器領域においては、抗PD-1抗体がⅣ期非小細胞肺がんの予後を著しく改善させたが、その奏効率は、20%前後とその効果は限定的であった。現在、CTLA-4とPD-1/PD-L1以外にも複数の免疫チェックポイント分子が存在することが分かっている。本研究においては、免疫チェックポイント分子であるPD-1ホモログ（PD-1H）、B7-H3、B7-H4、BTNL2に対する抗体作製を行っている。チオグリコレートにて誘導したマウス腹腔滲出性マクロファージのmRNAから、これらホモログのcDNAをRT-PCRによりクローニングした。組換え発現ベクターに導入し、これらホモログと免疫グロブリンのキメラ蛋白をチャイニーズハムスター卵巣細胞に発現させ、培養上清からプロテインＧカラムを用いて可溶型キメラ蛋白を精製した。これらを抗原として、ラットの足底に皮下注射で免疫を行い、リンパ節B細胞を回収し、 マウスミエローマ細胞との細胞融合を行い、融合細胞（ハイブリドーマ）を作製、モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマをスクリーニングし、抗体作製を行っている。これらの分子は、免疫チェックポイント分子としてがん免疫の抑制などへの関与が示されているが、その機能、及び受容体に関しては明らかではない。本研究で作製した抗PD-1ホモログ抗体により、CD4陽性T細胞増殖がex vivoで亢進する可能性が認められた。また、同抗体によりOVA誘導性喘息モデルマウスにおける気管支肺胞洗浄中の好酸球数がin vivoで増加する可能性が示唆された。抗PD-1ホモログ抗体の機能解析、及び、新たな抗PD-1ホモログ抗体、B7-H3、B7-H4、BTNL2抗体の樹立を進める。

Research Products

• [Journal Article] Cyclooxygenase inhibition in mice heightens adaptive‐ and innate‐type responses against inhaled protease allergen and IL ‐33 (2019)
  • Author(s): Maruyama Natsuko、Takai Toshiro、Kamijo Seiji、Suchiva Punyada、Ohba Mai、Takeshige Tomohito、Suzuki Mayu、Hara Mutsuko、Matsuno Kei、Harada Sonoko、Harada Norihiro、Nakae Susumu、Sudo Katsuko、Okuno Toshiaki、Yokomizo Takehiko、Ogawa Hideoki、Okumura Ko、Ikeda Shigaku
  • Journal Title: Allergy Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • DOI: doi: 10.1111/all.13831
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Combination of TWEAK and TGF-β1 induces the production of TSLP, RANTES, and TARC in BEAS-2B human bronchial epithelial cells during epithelial-mesenchymal transition (2018)
  • Author(s): Matsuno Kei、Harada Norihiro、Harada Sonoko、Takeshige Tomohito、Ishimori Ayako、Itoigawa Yukinari、Katsura Yoko、Kodama Yuzo、Makino Fumihiko、Ito Jun、Atsuta Ryo、Akiba Hisaya、Takahashi Kazuhisa
  • Journal Title: Experimental Lung Research Volume: 44 Pages: 332～343
  • DOI: doi: 10.1080/01902148.2018.1522558
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Characterization of tenascin-C as a novel biomarker for asthma: utility of tenascin-C in combination with periostin or immunoglobulin E (2018)
  • Author(s): Yasuda Mina、Harada Norihiro、Harada Sonoko、Ishimori Ayako、Katsura Yoko、Itoigawa Yukinari、Matsuno Kei、Makino Fumihiko、Ito Jun、Ono Junya、Tobino Kazunori、Akiba Hisaya、Atsuta Ryo、Izuhara Kenji、Takahashi Kazuhisa
  • Journal Title: Allergy, Asthma & Clinical Immunology Volume: 14 Pages: 印刷中
  • DOI: doi: 10.1186/s13223-018-0300-7
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Difference between two exhaled nitric oxide analyzers, NIOX VERO? electrochemical hand-held analyzer and NOA280i? chemiluminescence stationary analyzer (2018)
  • Author(s): Tanabe Yuki、Harada Norihiro、Ito Jun、Matsuno Kei、Takeshige Tomohito、Harada Sonoko、Takemasa Mirano、Kotajima Masaki、Ishimori Ayako、Katsura Yoko、Makino Fumihiko、Atsuta Ryo、Takahashi Kazuhisa
  • Journal Title: Journal of Asthma Volume: 56 Pages: 167～172
  • DOI: doi: 10.1080/02770903.2018.1439953
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dasatinib Suppresses TGFβ-Mediated Epithelial?Mesenchymal Transition in Alveolar Epithelial Cells and Inhibits Pulmonary Fibrosis (2018)
  • Author(s): Kanemaru Ryota、Takahashi Fumiyuki、Kato Motoyasu、Mitsuishi Yoichiro、Tajima Ken、Ihara Hiroaki、Hidayat Moulid、Wirawan Aditya、Koinuma Yoshika、Hayakawa Daisuke、Yagishita Shigehiro、Ko Ryo、Sato Tadashi、Harada Norihiro、Kodama Yuzo、Nurwidya Fariz、Sasaki Shinichi、Niwa Shin-ichiro、Takahashi Kazuhisa
  • Journal Title: Lung Volume: 196 Pages: 531～541
  • DOI: doi: 10.1007/s00408-018-0134-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Malignant Pleural Mesothelioma with Bone Marrow Metastases (2018)
  • Author(s): Ihara Hiroaki、Harada Norihiro、Shimada Naoko、Kanamori Koichiro、Hayashi Takuo、Uekusa Toshimasa、Takahashi Kazuhisa
  • Journal Title: Internal Medicine Volume: 57 Pages: 2541～2545
  • DOI: doi: 10.2169/internalmedicine.9246-17
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 気管支喘息と自然リンパ球 (2018)
  • Author(s): 原田紀宏
  • Organizer: 日本アレルギー学会第１回関東地方会
  • Invited
• [Presentation] Circulating levels of soluble TIM-4 in the patients with asthma (2018)
  • Author(s): Yuki Tanabe, Norihiro Harada, Sonoko Harada, Kei Matsuno, Tomohito Takeshige, Jun Ito, Sachiko Miyake, Kazuhisa Takahashi, Hisaya Akiba
  • Organizer: 第47回日本免疫学会学術集会
• [Presentation] Innate lymphoid cell subsets in peripheral blood of patients with asthma treated with mepolizumab (2018)
  • Author(s): Hitoshi Sasano, Norihiro Harada, Sonoko Harada Yuki Tanabe Yuuki Sandhu, Tomohito Takeshige, Kei Matsuno, Ayako Ishimori, Fumihiko Makino, Jun Ito, Asako Chiba, Sachiko Miyake, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: The 3rd International Conference on Innate Lymphoid Cells
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Chitin induced production of prostaglandine E2 in alveolar macrophages and bronchial epithelial cells (2018)
  • Author(s): Tomohito Takeshige, Norihiro Harada, Kei Matsuno, Ayako Ishimori, Yuki Tanabe, Hitoshi Sasano, Ai Nakamura, Sonoko Harada, Yoko Katsura, Fumihiko Makino, Jun Ito, Ryo Atsuta, Hisaya Akiba, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: The 23nd congress of the Asian Paciffic Society of Respirology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 気管支喘息と自然リンパ球 (2018)
  • Author(s): 原田紀宏
  • Organizer: XXIV World Congress of Asthma
  • Invited
• [Presentation] Chitin Induced Production of Prostaglandin E2 in Alveolar Macrophages and Bronchial Epithelial Cells (2018)
  • Author(s): Tomohito Takeshige, Norihiro Harada, Kei Matsuno, Ayako Ishimori, Yuki Tanabe, Hitoshi Sasano, Sonoko Harada, Yoko Katsura, Fumihiko Makino, Jun Ito, Ryo Atsuta, Hisaya Akiba, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: XXIV World Congress of Asthma
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] ヒト気道上皮細胞におけるキチンによるPGE2産生誘導 (2018)
  • Author(s): 竹重智仁，原田紀宏，石森絢子，松野圭，原田園子，三道ユウキ，上田翔子，安部寿美子，中村愛，笹野仁史，田辺悠記，桂蓉子，牧野文彦，伊藤潤，秋葉久弥，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第67回日本アレルギー学会学術大会
• [Presentation] 気管支喘息のバイオマーカーとしての血清テネイシンC値の可能性 (2018)
  • Author(s): 浅地美奈，原田紀宏，原田園子，石森絢子，桂蓉子，糸魚川幸成，松野圭，牧野文彦，伊藤潤，小野純也，飛野和則，秋葉久弥，熱田了，出原賢治，高橋和久
  • Organizer: 第67回日本アレルギー学会学術大会
• [Presentation] メポリズマブ投与6か月における重症喘息に対する効果 (2018)
  • Author(s): 笹野仁史，原田紀宏，田辺悠記，松野圭，石森絢子，原田園子，安部寿美子，上田翔子，三道ユウキ，中村愛，竹重智仁，桂蓉子，伊藤潤，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第67回日本アレルギー学会学術大会
• [Presentation] 大根の辛み成分のアレルギーと診断した一例 (2018)
  • Author(s): 安部寿美子，伊藤潤，桂蓉子，原田園子，上田翔子，三道ユウキ，中村愛，田辺悠記，笹野仁史，竹重智仁，松野圭，石森絢子，原田紀宏，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第67回日本アレルギー学会学術大会
• [Presentation] 気道上皮細胞におけるTWEAKのTSLP産生誘導について (2018)
  • Author(s): 松野圭，原田紀宏，石森絢子，原田園子，三道ユウキ，上田翔子，安部寿美子，中村愛，笹野仁史，田辺悠記，竹重智仁，桂蓉子，糸魚川幸成，牧野文彦，伊藤潤，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第67回日本アレルギー学会学術大会
• [Presentation] Chitin induced production of prostaglandin E2 in alveolar macrophages and bronchial epithelial cells (2018)
  • Author(s): Tomohito Takeshige, Norihiro Harada, Kei Matsuno, Ayako Ishimori, Yuki Tanabe, Hitoshi Sasano, Ai Nakamura, Sonoko Harada, Yoko Katsura, Fumihiko Makino, Jun Ito, Ryo Atsuta, Hisaya Akiba, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: American Thoracic Society International Conference 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 重症喘息に対するメポリズマブの効果 (2018)
  • Author(s): 田辺悠記，原田紀宏，松野圭，石森絢子，原田園子，上田翔子，三道ユウキ，笹野仁史，中村愛，竹重智仁，桂蓉子，伊藤潤，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] 抗IL-5抗体治療が著効し，治療中止後の経過を追っている好酸球性細気管支炎の一例 (2018)
  • Author(s): 上田翔子，伊藤潤，原口瑞樹，石森絢子，原田園子，山道ユウキ，笹野仁史，田辺悠記，竹重智仁，松野圭，牧野文彦，長島修，原田紀宏，熱田了，高橋和久
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] Chitin induced airway inflammation and production of prostaglandin E2 (2018)
  • Author(s): Tomohito Takeshige, Norihiro Harada1, Kei Matsuno, Ayako Ishimori, Yuki Tanabe, Hitoshi Sasano, Ai Nakamura, Sonoko Harada, Yoko Katsura, Fumihiko Makino, Jun Ito, Ryo Atsuta, Hisaya Akiba, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] Circulating levels of tenascin-C as type 2 biomarkers in the patients with asthma (2018)
  • Author(s): Mina Asaji, Norihiro Harada, Sonoko Harada, Ayako Ishimori, Yoko Katsura, Yukinari Itoigawa, Kei Matsuno, Fumihiko Makino, Jun Ito, Junya Ono, Kazunori Tobino, Hisaya Akiba, Ryo Atsuta, Kenji Izuhara, and Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] TWEAK induced TSLP expression in human bronchial epithelial cells (2018)
  • Author(s): Kei Matsuno, Norihiro Harada, Tomohito Takeshige, Sonoko Harada, Ayako Ishimori, Yuki Tanabe, Hitoshi Sasano, Ai Nakamura, Yoko Katsura, Fumihiko Makino, Jun Ito, Ryo Atsuta, Kazuhisa Takahashi
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] 携帯電話アプリ「ぜんそくログ」による喘息実態調査 (2018)
  • Author(s): 原田紀宏，伊藤潤，原田園子，三道ユウキ，上田翔子，浅地美奈，中村愛，笹野仁史，田辺悠記，竹重智仁，松野圭，石森絢子，牧野文彦，熱田了，堀賢，高橋和久
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] 当院におけるNintedanibの使用経験 (2018)
  • Author(s): 中村貴裕，加藤元康，河野加奈，山田朋子，井原宏彰，金丸良太，佐藤 匡，原田紀宏，十合晋作，長岡鉄太郎，高橋史行，瀬山邦明，高橋和久
  • Organizer: 第58回日本呼吸器学会学術講演会