2016 Fiscal Year Research-status Report
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16K09654
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
野々口 博史 北里大学, 北里大学メディカルセンター, 部長(医師) (30218341)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
泉 裕一郎 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (20736243)
安岡 有紀子 北里大学, 医学部, 講師 (50348504)
河原 克雅 北里大学, 医学部, 教授 (70134525) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | エリスロポエチン / アルドステロン / バゾプレシン / HIF2α / RAS系 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
腎臓は体液恒常性維持のための電解質代謝、酸塩基平衡の調節を司るだけでなく、造血ホルモンであるエリスロポエチン産生の場でもある。これまでエリスロポエチンは、腎尿細管ではなく、腎間質の繊維芽細胞で産生されると考えられてきた。我々は、北里大学生理学教室との共同研究で、高感度in situ hybridization法(ISH)を用いて、正常状態においては、腎皮質部の尿細管、中でも集合尿細管間在細胞で特に産生されることを明らかにした。そこで、ISH法、免疫染色法（IHC）に加え、microdissection法による単離尿細管採取を行い、そこから微量のRNA抽出を行い、cDNA合成を行った後、Real Time PCRを用いて、腎尿細管におけるエリスロポエチン遺伝子発現に対するアルドステロンの作用とその機序について検討した。
ISHにおいて、アルドステロンのアナログであるフロリネフ投与4-6時間後に遠位曲尿細管、皮質部集合尿細管を主体として、エリスロポエチン遺伝子発現の増加が見られ、IHCでも同様で、集合尿細管では、間在細胞でエリスロポエチン発現が著しく増加していた。また、これまで、産生されてもすぐに分泌されるため不可能とされてきたWestern blot法で合成エリスロポエチンによる吸収試験でエリスロポエチンのバンドが40ｋDaであることも、世界で初めて明らかにした。さらに、単離尿細管を用いて、集合尿細管、ヘンレの太い上行脚などで、アルドステロン、バゾプレッシン、アンギオテンシンIIがエリスロポエチン遺伝子発現を増加させることを明らかにした。
これらのことで、アルドステロン、バゾプレシン、アンギオテンシンIIが造血ホルモンであり、尿細管でのエリスロポエチン産生を制御している事が明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
これまで、産生後すぐに分泌されため不可能とされてきたwestern blot法でのエリスロポエチンのバンドの確認ができ、外因性アルドステロンであるフロリネフ投与でエリスロポエチン発現が増加すことも確認できており、世界的な新しい知見となることは間違いないためである。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在は、低酸素刺激で腎臓でエリスロポエチン産生が亢進するとされてきたが、それが本当であるかどうかをwestern blotとreal time PCR法での検討を開始した・これまでのところ、低酸素1時間で、腎でのエリスロポエチン遺伝子発現が10倍に増加し、蛋白発現も増加しているが、4時間では、逆に減少している。一方、生後はエリスロポエチンを産生しないとされている肝臓でのエリスロポエチン遺伝子発現が、低酸素4時間で増加するが、蛋白発現は増加していないことも確認している。低酸素で分泌されるエリスロポエチンは、新たに産生されるのではなく、貯蔵されていたものが放出されるだけとの意見もあり、急性の低酸素刺激でのエリスロポエチン産生の機序と産生部位についての検討を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
少額であり、次年度に持ち越して使用する方が、有用であると考えたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
物品費として使用する予定である。
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Research Products
(6 results)
