2018 Fiscal Year Research-status Report
Pathogenesis and treatment of multiple system atrophy
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16K09672
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
山門 穂高 京都大学, 医学研究科, 助教 (10378771)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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Keywords | 多系統萎縮症 |
Outline of Annual Research Achievements |
多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより超遠心法によりエクソソーム分画を抽出し、変異型A53Tα-シヌクレインをニューロン・オリゴデンドロサイトに本来のα-シヌクレインの発現パターンで高発現するA53Tα-シヌクレインBACトランスジェニックマウスに接種した。本マウスは外来のα-シヌクレインフィブリルに感受性が高く、その接種で極めて急速なα-シヌクレインフィブリルの伝播が生じることが判明している。レビー小体型認知症(DLB)由来のエクソソームではレビーニューライト(Lewy neurite)様の凝集体形成を認めたが、多系統萎縮症(MSA)由来のエクソソームの接種では、Lewy neurite様の凝集に加えて、小型のround-shapeの形状の、glial cytoplasmic inclusion (GCI)様の凝集体形成を認めた。本結果は、エクソソームが細胞特異的なα-シヌクレイン伝播を司る可能性を示唆するものであった。また、疾患特異的α-シヌクレインフィブリルの存在に関して、多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより調整した各分画をseedとしてRT-QUICによりα-シヌクレインフィブリルを増幅させることが可能であり、この増幅fibrilを解析予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより超遠心法により抽出したエクソソーム分画のinjectionとその解析はほぼ終了している。また、疾患特異的α-シヌクレインフィブリルの存在に関して、多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより調整した各分画をseedとしてRT-QUICによりα-シヌクレインフィブリルを増幅させることが可能であった。
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Strategy for Future Research Activity |
多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより超遠心法によりエクソソーム分画を抽出し、変異型A53Tα-シヌクレインをニューロン・オリゴデンドロサイトに本来のα-シヌクレインの発現パターンで高発現するA53Tα-シヌクレインBACトランスジェニックマウスに接種した。レビー小体型認知症(DLB)由来のエクソソームではレビーニューライト(Lewy neurite)様の凝集体形成を認めたが、多系統萎縮症(MSA)由来のエクソソームの接種では、Lewy neurite様の凝集に加えて、小型のround-shapeの形状の、glial cytoplasmic inclusion (GCI)様の凝集体形成を認めた。この凝集体のさらなる解析のために、免疫蛍光二重染色を行うこと、またsonicationによりエクソソームを破壊した脳抽出液を接種し比較することにより、エクソソームの効果をさらに検証する。また、疾患特異的α-シヌクレインフィブリルの存在に関して、多系統萎縮症(MSA)、レビー小体型認知症(DLB)、正常高齢者の脳サンプルより調整した各分画をseedとしてRT-QUICによりα-シヌクレインフィブリルを増幅させることが可能であり、この増幅fibrilの立体構造、seeding能力などを解析予定である。
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Causes of Carryover |
遺伝子改変マウス(αsyn BAC Tgマウス)への疾患脳由来エクソソームのinjectionにおいて、再現性確認・より詳細な解析のため、再実験をする必要が生じたため。
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Research Products
(9 results)