Searching for the novel therapeutic targets in pituitary tumors

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K09810
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 谷 祐至 北里大学, 医学部, 講師 (30456214)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 下垂体腫瘍

Outline of Annual Research Achievements

転写因子Promyelotic leukaemia zinc finger protein (PLZF)は元来、急性前骨髄性白血病でレチノイン酸受容体(RARα)との融合遺伝子として同定された転写因子であり、最近では前立腺癌などの腫瘍増殖や薬剤抵抗性において大変注目されている。はじめにPLZFの発現・局在を確認したところ、マウス下垂体に強発現していた。次に各種細胞株を用いた蛍光免疫染色では、GH産生下垂体腫瘍細胞株 (GH3)で特に強い発現を認め、主に核内、一部細胞質へ局在していた。そこで、GH3細胞を用いて、核内と細胞質の局在変化を調節する因子について探索した。PLZFは転写抑制因子として働くために核内への移行が必要である。Dexamethasone (DEX)とRARαに結合するRetinoic acidはPLZFの発現を亢進させ、核内移行を促進した、一方、エストロゲンやGenisteinは核内での発現を低下させることが分かった。この作用には、細胞質から核内への移行を抑制する作用と、細胞内での遺伝子発現を調節している可能性が考えられた。そこで、過剰発現・ノックダウン・各種薬剤添加によりPLZFの発現を変化させ、下流シグナルについて検討した結果、脂質代謝、特にLDL受容体の発現制御に関わることを明らかにした。さらに、ChIP assayでLDL受容体の上流にPLZF結合サイトを確認した。ChIP seqでの詳細な解析を進めた。一方、これまで我々はGH産生腫瘍においてPRRがV-ATPaseの作用を介してGH分泌に影響を及ぼすことを明らかにしてきた。V-ATPaseはオートファジーやアポトーシスと関連し、がん細胞株や腫瘍組織での役割が報告されている。PLZFとPRRも相互に影響していることから、PLZFのV-ATPase作用を介したオートファジーについての検討も進めた。