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2016 Fiscal Year Research-status Report

肺線維症の病因におけるAIF-1の役割の解明と治療法の開発

Research Project

Project/Area Number 16K09900
Research InstitutionKyoto Prefectural University of Medicine

Principal Investigator

川人 豊  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50336731)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 河野 正孝  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (60405256)
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
KeywordsAIF-1 / 肺線維症 / ブレオマイシン
Outline of Annual Research Achievements

リコンビナントAIF-1/抗AIF-1抗体の作成
リコンビナントAIF-1は、ヒトAIF遺伝子を末梢血リンパ球のcDNAよりPCR法にて増幅させ、得られたDNA fragmentを、GST purification systemと抗AIF-113-129抗体アフィニティークロマトグラフィーにより、融合タンパク質を精製した。モノクローナル抗体は、上記蛋白をウサギに免疫し血清を精製後、マウスの脾臓細胞とマウスミエローマ細胞を共存培養で細胞融合し、ハイブリドーマを作成して精製した。

ブレオマイシン誘導肺線維症マウスモデルにおけるAIF-1の発現検討
8~10週齢のオスC57/BL6マウスに、ブレオマイシン経気道散布し、ブレオマイシン誘導性のマウス肺線維症モデルを作成した。HE染色、Masson-Trichrome染色で肺線維化形成のある事を確認の上、同モデル使用し。以下の結果を得た。急性期において、AIF-1は肺胞マクロファージおよひ肺胞洗浄液中にAIF-1が高発現を示し、リコンビナントAIF-1は単球細胞株であるRAW2647細胞およびC57/BL6マウス由来の肺線維芽細胞からのTNFα、IL6産生を促進させた。また肺線維芽細胞より好中球のケモカインであるCXCLl(KC)の産生も上昇をさせることも確認した。線維化に関与する機序として、マクロファージからのTGF-βの産生増加、培養線維芽細胞の遊走を誘導している事を明らになった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

リコンビナントAIF-1/抗AIF-1抗体の作成を作成した。また、ブレオマイシン誘導肺線維症マウスモデルにおける急性・慢性期での肺線維化に関与するAIF-1の機能解析を行い、AIF-1がケモカインを誘導し、線維芽細胞遊走を刺激することを明らかにした。

Strategy for Future Research Activity

現在、慢性線維化期での発現細胞を詳細に同定中で、肺間質の線維化を惹起するAIF-1の生物活性について、特に繊維芽細胞のαMSA発現やepithelial-mesenchymal transition (EMT)への関与を検討していく。

  • Research Products

    (1 results)

All 2017

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] マウスブレオマイシン誘導肺線維症におけるAIF-1の役割2017

    • Author(s)
      永原秀剛、妹尾高宏、井上拓也、木田節、中林周、茎田祐司、藤岡数記、和田誠、河野正孝、川人豊
    • Organizer
      第61回日本リウマチ学会総会・学術集会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2017-04-20 – 2017-04-22

URL: 

Published: 2018-01-16  

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