2018 Fiscal Year Annual Research Report
The mechanism of dendritic cell-derived osteoclasts in the pathogenesis of arthritis.
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16K09915
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| Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
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Principal Investigator |
花見 健太郎 産業医科大学, 医学部, 助教 (50441853)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保 智史 産業医科大学, 医学部, 助教 (70461548)
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| Project Period (FY) |
2016-10-21 – 2019-03-31
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| Keywords | 樹状細胞 / 破骨細胞 / 抗原提示能 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では炎症病態における樹状細胞由来破骨細胞の分化機序、機能、病態への影響に関して検討を行った。
１．樹状細胞由来破骨細胞（dendritic derived osteolast; DCOC）分化誘導系を構築した。：健常人末梢血よりCD１４陽性細胞を分離し、GM-CSF刺激を加え、分化培養開始後６日目にM-CSF刺激、９日及び１５日にM-CSF+RANKL刺激をそれぞれ行い、２１日目まで培養を行い、DCOC分化誘導を行った。
２．DCOCが有する破骨細胞様形質の評価：培養開始後２１日目にTRAP染色を行い、TRAP陽性細胞数・細胞核数・細胞融合について評価した。DCOC分化誘導前・分化培養開始９日目・２１日目の細胞からｍRNAを抽出し、定量性PCR法にてカテプシンK、NFATｃ１、DC-STAMPの発現を測定した。ヒト単球由来破骨細胞とDCOCを象牙切片スライス上で培養開始後、２１日目にピットフォーメイションアッセイにて骨吸収窩面積の定量を行った。
３．DCOCの樹状細胞様性質の価：分化培養開始２１日目のDCOCにおいて細胞表面マーカーCD80/86の発現を免疫蛍光染色法にて評価し、培養開始１８日目より２１に目までCD4陽性T細胞と共培養を行い、２１日目にサイミジンアップテイク法により細胞増殖能を評価した。
４．関節炎滑膜におけるる樹状細胞由来破骨細胞（dendritic derived osteolast; DCOC）と、関節炎及び関節破壊との関連を明らかにするため、ラット関節炎モデルを用いたin vivoでの解析を行った。
５．滑膜組織におけるDCOC様細胞と、関節炎・関節破壊など臨床指標との関連を明らかにするため、関節リウマチ患者検体を用いた解析を行った。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] Relevance of interferon-gamma in pathogenesis of life-threatening rapidly progressive interstitial lung disease in patients with dermatomyositis.2018
Author(s)
Ishikawa Y, Iwata S, Hanami K, Nawata A, Zhang M, Yamagata K, Hirata S, Sakata K, Todoroki, Nakano, Nakayamada, Satoh, Tanaka.
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Journal Title
Arthritis Res Ther.
Volume: 20(1)
Pages: 240
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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