2016 Fiscal Year Research-status Report
好中球機能からみた炎症性皮膚疾患の病態解明とその治療法の確立
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16K10130
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
東 裕子 鹿児島大学, 医歯学域附属病院, 講師 (00381179)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山口 宗一 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (20325814)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 好中球 / miRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
好中球性皮膚疾患の病態に関わる好中球の働きをmiRNAの側面から解明するために、in vivo（患者由来miRNA）とin vitro（培養細胞由来miRNA）の2側面からの研究計画を立て、疾患特異的に発現が変化するmiRNAを同定することを目指し以下の実験準備および予備実験を行った。in vivoでは、好中球性皮膚疾患患者における顆粒球に発現しているmiRNA発現の検討を行うために、好中球性皮膚疾患患者とコントロール疾患患者のリクルートのための臨床研究計画、倫理員会書類を作成・受理され、現在はそれらの検体を集積中である。in vitroでは、好中球様培養細胞の炎症刺激により変化するmiRNAを検討するため、好中球様細胞への分化の報告がある単核球系細胞株HL-60を用いて実験系の確立を試みた。分化誘導因子としてPMA・レチノイン酸（ATRA）を用いて、ヘマトキシリン・エオジン染色による形態学的な観察を行った。いずれの分化誘導因子でも好中球様の核分葉が見られたものの、PMAでは核の細胞外漏出、細胞死が目立った。次に、好中球様細胞への分化過程でmiRNAの発現が変化するかの予備実験を行った。ATRA刺激後3日目のHL-60では、miR-223の発現が優位に増加しており、過去の報告と一致した。また、白血球に比較的発現しているmiR-142-3pは刺激前後の変化が見られなかった。以上の培養細胞実験より、ATRAによるHL-60 が好中球様細胞へ分化していることが確認できた。HL-60を本研究に使用することは可能であり、今後、この細胞を用いて、次のステップへと研究を進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
予備実験が進んでおり、おおむね順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
末梢血から好中球を分離し、RNA を抽出し、microarray による比較検討を行う予定である。miRNAのプロファイリングを実施し、同定した好中球性皮膚疾患の病態に関わるmiRNA 並びに、文献上重要と思われるmiRNAも加えて機能評価を行っていく。
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