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2017 Fiscal Year Research-status Report

Wntシグナルによる発毛の制御

Research Project

Project/Area Number 16K10133
Research InstitutionNara Medical University

Principal Investigator

王寺 幸輝  奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (50343421)

Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
Keywords発毛 / Wnt / 細胞 / 培養 / 移植 / 幹細胞 / 毛乳頭 / マウス
Outline of Annual Research Achievements

本研究計画では、発毛シグナルとして近年注目されているWntシグナルに着目し、『発毛の制御』を実現することを目標とする。
平成28年度(初年度)は、発毛に関わるWntシグナルの発現をreal time RT-PCRおよび免疫染色を用いて経時的に精査した。その結果、胎生期・生後・成獣マウスの各時期における皮膚・毛包の発生においてWnt/Frizzled各種ファミリーの複雑な発現パターンが存在することが明らかとなった。これらの成績を踏まえ、平成29年度(次年度)は、“発毛に特に重要なWnt/Frizzledファミリー”に着目し、in vitro培養系による影響を精査した。発毛段階で特に発現の高いWntに着目し、毛包幹細胞(EpSC)あるいは毛乳頭細胞(DPC)の培養系で細胞増殖、細胞分化等に対して調べた結果、ある種のWntが顕著な影響を及ぼす成績となった。さらに、マウス胎児皮膚(毛包形成段階前後)や成獣マウスより単離した毛包器官ユニットをin vitroで培養することで、毛包組織レベルでの影響を調べた結果、培養細胞系の成績と異なる影響も得られたことから、各種細胞から構成される“器官”での細胞間相乗的な効果も存在することが示唆された。
最終年度となる平成30年度は、より生理的環境下において、Wntシグナルによる発毛制御を実現するために、成獣マウスの体毛を用いたin vivo実験を行う予定である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画に基づき、培養細胞系において期待した実験成果が得られている。また、学会発表等で成果報告を行っており、現在までに得られている成績をもとに、現在論文作成中である。

Strategy for Future Research Activity

最終年度(平成30年度)では、これまでに得られた成績をもとに、発毛に特に重要なWnt/Frizzledファミリーに着目し、網羅的遺伝子解析と、Wntシグナルによるin vivo発毛制御を試みる。
網羅的遺伝子解析では、毛包器官あるは胎児皮膚培養系(in vitro培養系)においてWntシグナルにより変化する遺伝子群を、フローサイトメーター(FACS)あるいはレーザーマイクロダイセクション(LMD)を用いて分取し、DNA arrayにより解析する。これにより、発毛におけるWntシグナル以外の遺伝子発現変動をフィードバック解析することで、発毛制御に関わるクロストークシグナル、動態を詳細に解析し、発毛に必須の条件・状態を見出す。
また、生理的環境下でのWntシグナルによる発毛制御を実現するために、成獣マウスの体毛を用いてin vivo実験を行う。Wnt/Frizzledタンパク質を含侵させたビーズを移植することで、体毛における発毛制御を試みる。同時に、移植後に発毛が認められる毛包内の各種細胞を各種細胞マーカーにより単離し(FACSにより)、real time RT-PCRおよび免疫染色を用いて解析する。これをもとに、生体内での発毛制御後に生じる発現変動を詳細に解析し、論理的に発毛制御のメカニズムを解明する。

Causes of Carryover

(理由)
本研究計画の本年度(平成28-29年度)までに、in vitro細胞培養系を用いることで発毛に関わる種々の遺伝子発現変化を解析し、更に実験動物から単離した皮膚・毛包を用いて解析した。そのため、消耗品(各種培地やプラスチックシャーレ等)、実験動物の購入に研究費を使用した。本研究計画の発展的研究として、網羅的遺伝子発現解析を行う目的で、DNA array等の受託解析を行う予定であったが、本年度内に実施することができなかった。そのため、繰越金を使用して最終年度(平成30年度)の初頭に行う予定である。
(使用計画)
最終年度では、繰越金を合算してDNA array等を用いた解析を行いつつ、これまでに購入した消耗品を継続して使用することや、実験に必要な物品を計画的に購入することで、研究を遂行する。

  • Research Products

    (12 results)

All 2018 2017

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Ancylostoma ceylanicum, novel etiological agent for traveler's diarrhea-report of four Japanese patients who returned from Southeast Asia and Papua New Guinea.2018

    • Author(s)
      Yoshikawa M, Ouji Y, Hirai N, Nakamura-Uchiyama F, Yamada M, Arizono N, Akamatsu N, Yoh T, Kaya D, Nakatani T, Kikuchi E, Katanami Y, Satoh K, Maki R, Miyazato Y, Oba Y, Kasahara K, Mikasa K.
    • Journal Title

      Trop Med Health

      Volume: 46 Pages: 1-8

    • DOI

      10.1186/s41182-018-0087-8.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Efficient induction of inner ear hair cell-like cells from mouse ES cells using combination of Math1 transfection and conditioned medium from ST2 stromal cells.2017

    • Author(s)
      Ouji Y, Sakagami M, Omori H, Higashiyama S, Kawai N, Kitahara T, Wanaka A, Yoshikawa M.
    • Journal Title

      Stem Cell Res

      Volume: 23 Pages: 50-56

    • DOI

      10.1016/j.scr.2017.06.013

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] パプアニューギニアで感染し虫卵の遺伝子学的同定によりセイロン鉤虫症と診断した1例2017

    • Author(s)
      片浪 雄一、中村 ふくみ[内山]、佐藤公俊、王寺幸輝、吉川正英、三笠桂一
    • Journal Title

      感染症学雑誌

      Volume: 91 Pages: 759-763

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 2009年にマレーシアにて感染したセイロン鉤虫症例 海外渡航にて感染した日本人の同症第1確定例2017

    • Author(s)
      山田稔、有薗直樹、赤松尚明、楊孝治、王寺幸輝、平位暢康、笠原敬、三笠桂一、吉川正英
    • Journal Title

      Clinical Parasitology

      Volume: 28 Pages: 36-38

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 奈良県立医科大学感染症センター寄生虫外来10年の経験 海外渡航者外来とともに2017

    • Author(s)
      平位暢康、吉川正英、小川拓、中村ふくみ、王寺幸輝、平田一記、今井雄一郎、藤倉裕之、吉井誠也、吉原真吾、今北菜津子、小川吉彦、米川真輔、菱矢直邦、梶田明裕、白石直敬、佐藤公俊、福森達也、辻本和徳、中川智代、宇野健司、笠原敬、前田光一、古西満、武山雅博、大西智子、片浪雄一、忽那賢志、三笠桂一
    • Journal Title

      Clinical Parasitology

      Volume: 28 Pages: 9-12

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 長期培養維持した毛包上皮幹細胞のキャラクタリゼーション2018

    • Author(s)
      王寺幸輝、河合紀和、阪上雅治、吉川正英
    • Organizer
      第17回 日本再生医療学会総会
  • [Presentation] Effects of vestibular cell-conditioned medium on differentiation of embryonic stem cells into inner ear vestibular hair cells2018

    • Author(s)
      Sakagami M, Ouji Y, Kawai N, Kitahara T, Yoshikawa M.
    • Organizer
      41st Annual MidWinter Meeting, Association for research in otolaryngology (ARO)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Maintenance and long-term expansion of murine skin epithelial stem cells by Wnt signaling pathway2017

    • Author(s)
      Ouji Y, Sakagami M, Kawai N, Yoshikawa M.
    • Organizer
      10th World Congress for Hair Research 2017
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] セイロン鉤虫症は海外渡航時に注意すべき感染症であるー日本人4症例の検討ー2017

    • Author(s)
      吉川正英、王寺幸輝、中村ー内山ふくみ、有薗直樹、山田稔、赤松尚明、賀屋大介、片浪雄一、眞木良祐、大場雄一郎
    • Organizer
      第58回 日本熱帯医学会大会
  • [Presentation] 2009年にマレーシアにて感染したセイロン鉤虫症例 海外感染した日本人の同症第一確定例2017

    • Author(s)
      赤松尚明、山田稔、有薗直樹、楊孝治、王寺幸輝、吉川正英
    • Organizer
      第28回 日本臨床寄生虫学会大会
  • [Presentation] 奈良医大感染症センター寄生虫専門外来10年の経験2017

    • Author(s)
      平位暢康、吉川正英、中村ふくみ、王寺幸輝、今井雄一郎、藤倉裕之、吉井誠也、吉原真吾、今北菜津子、小川拓、小川吉彦、米川真輔、平田一記、菱矢直邦、梶田明裕、白石直敬、佐藤公俊、福森達也、辻本和徳、中川智代、宇野健司、笠原敬、前田光一、古西満、武山雅博、大西智子、片浪雄一、忽那賢志、三笠桂一
    • Organizer
      第28回 日本臨床寄生虫学会大会
  • [Book] 日常検査で役立つ寄生虫・原虫検出法 抗原・抗体反応を利用した寄生虫検査2017

    • Author(s)
      王寺幸輝、吉川正英
    • Total Pages
      6
    • Publisher
      Medical Technology

URL: 

Published: 2018-12-17  

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