2018 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of IL-33 function for cell division and proliferation in normal human epidermal keratinocytes
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16K10135
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
津田 英利 自治医科大学, 医学部, ポスト・ドクター (30414923)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ケラチノサイト / IL-33 / 細胞局在 / 乾癬 / Th17 / 細胞増殖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでにIL-33を正常ヒト表皮角化細胞（NHEKs）にてsiRNAを用いてノックダウン（KD）した際、細胞質分裂が不完全になり、2核の細胞が増え、細胞増殖能が落ちることを明らかにした。しかしながら、IL-33の分泌機構、特に核内から細胞質への移動と、その際にfull lengthのまま移動するのか、それとも核内で修飾を受けいわゆるトランケートフォームとして移動するのかは明らかにされていなかった。そこでIL-33のN末端及びC末端に蛍光タンパク質を融合させたIL-33をNHEKsに強制発現させ、様々なサイトカインや紫外線による刺激を行った。しかし、N末端、C末端にラベルしたIL-33のいずれも、刺激によって核内から移動する様子は観察されなかった。またこの時、IL-33過剰発現によって細胞増殖能に影響を与えることは無かった。
乾癬モデルマウスについては野生型（WTマウス）とIL-33ノックアウトマウス（IL33KOマウス）についてイミキモドクリーム（IMQ）を連日7日間塗布することにより作成した。この時の耳介圧はWT並びにIL33KOマウスいずれも時間経過と共に厚くなっていったが、エンドポイントの7日目ではIL33KOマウスで有意に厚さが減少していた。この時、乾癬病態で重要なサイトカインの1つである血中IL-17Aの濃度を測定したところ、IMQ処理によりIL33KOマウスでは前日まではWTと同等の血中濃度を示すが、7日目ではコントロールと同等レベルまで減少することが解った。この時、IL-17Aの大きな産生細胞であると考えられている、Th17やILC3のマーカーの一つである転写因子RORγの発現量も血中IL-17Aと同様な挙動を示した。このことより、IL-33はTh17細胞の長期成熟に必要なサイトカインでは無いかと考えられた。
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